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编号:13408729
石菖蒲水提取物对人脑神经胶质细胞NO表达的影响(2)
http://www.100md.com 2019年9月5日 《中国医药导报》 2019年第25期
     1 材料与方法

    1.1 材料

    人脑神经胶质细胞(HEB,中山大学细胞动物实验中心);细胞培养基(DMEM)、胎牛血清(Gibco公司);0.25% 供应胰酶(Trypsin-EDTA)(1×)(GIBCO)、磷酸缓冲盐溶液(PBS)PH 7.2 basic(1×)(GENOM);石菖蒲饮片(康华药业);四甲基偶氮唑盐比色试剂(MTT)(广州妙博生物技术有限公司);NO(碧云天生物技术);倒置显微镜(NIKON TE300);二氧化碳培养箱(HSO301T-VBA);真空冷冻干燥机(Christ Alpha2-4LSC-Plus)、旋转蒸发仪(RV 10basic V)。

    1.2 石菖蒲冻干粉的制作

    将100 g石菖蒲饮片高速粉碎后转移到圆底烧瓶中,加1000 mL的超纯水,于电热套上加热,猛火烧沸后调至温火继续煮1 h,收集第一遍的水提液;再加400 mL超纯水至药渣中继续第二次煎煮,时间火候同第1次,后将2次收集的水提液混合;将收集的水提液离心2次(3000 r/min,5 min),收集上清液 ......
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