血管内皮细胞源外泌体对动脉粥样硬化大鼠免疫因子的影响(3)
配制蛋白BCA工作液形成定量标准曲线(30~500 μg/mL),取80 μL加入10 μL exosomes液,混匀后室温孵育30 min,nanodrop测OD值计算浓度;5 μg exosomes移入1.5 mL离心管,加10 μL Latex Beads混匀孵育15 min,适量PBS配至1 mL,振荡2 h加110 μL 1 mol/L甘氨酸,离心混合液3 min(4000 r/min,r = 8 cm),弃上清重悬,重复操作,400 μL PBS重悬后移入4个试管(每管100 μL),分别加入PE-anti CD86、FITC anti-mouse MHC Ⅰ、PE anti-CD54、FITC anti-mouse MHC Ⅱ流式抗体,4℃下避光孵育30 min,加PBS 1 mL离心3 min(4000 r/min,r = 8 cm),双次洗涤,200 μL PBS重悬后上机检测。1.4.3 动物造模 对照组大鼠常规饲养 ......
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