血清蛋白生物标志物免疫学测定技术研究进展(3)
3.2.1 液相悬浮芯片检测 液相悬浮芯片检测体系由许多大小均一的微球(直径约5.5 μm)为主要基质构成[25],通过两种不同的荧光染料按照不同比例混合标记形成100种不同色号的微球。每种微球通过共价结合包被一种可以捕获相应目标分子的生物探针(抗原、抗体、受体等),原则上在同一个反应体系内可同时检测一百个目标因子[26]。利用流式细胞分析系统和数字信号处理器等可对每个微球进行实时检测。同时记录代表微球色号的荧光信号和反映微球表面特异性免疫结合反应的荧光信号,从而定量检测待测样本中目标因子的含量。液相悬浮芯片技术的优势在于用少量样本对多种生物标志物进行定性、定量测定,节省了样本量及时间成本。此外,由于测试微球在液相中产生免疫反应,克服了固相芯片在大分子检测时表面张力、空间效应等对反应动力学的影响,提高了样品检测的可重复性(达到90%以上),且线性范围可以达到0.2~32 000 pg/mL[26]。Tan等[27]基于液相悬浮芯片技术建立了一种13-plex直接免疫试验平台,对血清IgG抗体定量测定,检测结果与ELISA比较后发现,该平台能够同时检测13种 ......
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