miR-501靶向BLID介导吉非替尼耐药性非小细胞肺癌的恶性表型(3)
1.4.4 细胞活力测定 PC9和PC9/GR接种于96孔板，每孔细胞数约8000个，用含有1 μmol/L吉非替尼的培养基培养，在4、24、48 h和72 h测定OD值。将PC9/GR接种于96孔板，每孔细胞数约为6000个，将miR-501 mimics(1.5 μL)、BLID过表达质粒(1.5 μL)，利用Lipofectamine 3000转染至PC9/GR培养48 h，然后更换培养基，在4、24、48 h和72 h测定OD值。本研究中，每孔100 μL培养基加入10 μL的CCK-8反应液，培养2 h后于酶标仪测定，波长设定450 nm。miR-501 mimics序列：5′-AGAAUCCUUGCCCGGGUGCAUU-3′。阴性对照mimics NC序列：5′-GUCGGUUCGCAUACUCACUGGA-3′。1.4.5 细胞划痕实验 将转染了miR-501 mimics、pcDNA3.1-BLID的PC9/GR接种于6孔板 ......
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