[摘要] 目的 建立更加快速便捷的肾脏肿瘤及正常肾小管上皮细胞原代培养方法。 方法 选取2019年1—3月首都医科大学附属北京朝阳医院行肾癌根治性切除术和肾部分切除术后患者新鲜的肾透明细胞癌组织和肾脏皮质组织。采用机械分解，胶原酶消化和细胞连续筛分提纯的方法提纯肿瘤和正常原代细胞。分别通过转录组测序(RNA-seq)技术鉴定两种原代细胞的遗传背景，免疫细胞化学鉴定细胞标志物的表达，透射电镜观察原代细胞的超微结构。最后采用裸鼠荷瘤模型鉴定肿瘤细胞的成瘤特性。 结果 共计分离纯化3株人近端肾小管上皮原代细胞，8株肾透明细胞癌原代细胞。RNA-seq显示测序结果符合两类细胞的遗传学背景，免疫细胞化学可鉴定出近端肾小管上皮细胞标志蛋白的表达。透射电镜可观察到两类细胞特异性超微结构。裸鼠荷瘤模型证实了肾癌原代细胞的成瘤特性。 结论 成功建立并确定一种快速便捷的肾癌细胞和肾小管上皮细胞原代培养的流程和方法。

    [关键词] 原代细胞培养;肾细胞癌;近端肾小管上皮细胞;转录组测序

    [中图分类号] R737.11 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2020)09(b)-0004-05

    [Abstract] Objective To establish a more rapid and convenient method for primary culture of renal tumor and normal renal tubular epithelial cells. Methods Fresh clear renal cell carcinoma tissue and renal cortical tissue from patients undergoing radical nephrectomy and partial nephrectomy in Beijing Chaoyang Hospital ......