1.2 方法

    所有标本为术中冰冻送检组织，经冰冻切片确诊后即选取组织常规固定，脱水，包埋。入选病例蜡块均做4 μm连续切片分别做苏木精-伊红染色、ISH和IHC检测。

    1.2.1 IHC染色 采用EnVison两步法。即用型单克隆抗体Rb(MS-107-R7)购于Thermo公司，EnVison检测试剂盒(GK500710)购于基因科技(上海)有限公司。切片需做EDTA pH8.0抗原微波修复处理，操作步骤按说明进行。用已知乳腺癌Rb蛋白阳性切片作阳性对照，以磷酸盐缓冲液(PBS)取代一抗作阴性对照。

    1.2.2 ISH 行地高辛标记ISH检测。HPV16/18 DNA探针和原位杂交试剂盒(ISH-5126)购于北京中杉金桥生物技术有限公司。用已知宫颈癌HPV16/18 DNA阳性切片作阳性对照，以PBS替代探针作阴性对照。

    1.3 疾病诊断标准

    病理医师双盲法阅片，取平均值计算阅片结果。ISH以细胞核内出现棕黄色颗粒为HPV16/18 DNA阳性标志 ......