GDNF基因克隆及表达载体的构建
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摘要:目的 克隆大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)全长基因,构建真核细胞表达质粒。方法 从孕17d大鼠胚胎脑组织中提取RNA,参照了分子克隆指南,合成cDNA第1、2链,加入引物PCR扩增目的基因,与pcDNA3质粒连接,构建表达质粒。结果 提取的总RNA经纯化后电泳出现18s和28s两条带,PCR扩增的目的基因为630bp大小的条带,测序结果为633bp。结论 正确地克隆了大鼠GDNF基因全序列,为进一步获得重组活性的GDNF蛋白和神经系统疾病的基础和临床研究奠定了基础。
关键词:胶质细胞源性神经营养因子;基因序列;载体;克隆
中图分类号:R394.8;Q782文献标识码:A文章编号:1000-5749(2004)01-0044-03
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