古方交泰丸镇静催眠有效部位配比研究
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(中山大学附属第一医院黄花岗街社区卫生服务中心,广东广州510095)
摘要：目的：研究交泰丸有效部位(黄连提取物、肉桂提取物)不同配比对镇静催眠作用的影响。方法：将小鼠分为3批，分别观察交泰丸有效部位不同配比对小鼠自主活动和戊巴比妥钠催眠作用的影响。结果：交泰丸不同配比的有效部位组合可明显抑制小鼠的自发活动，协同戊巴比妥钠的催眠作用。结论：交泰丸中黄连和肉桂镇静催眠有效部位的最佳配比为4∶1。
关键词：交泰丸；黄连；肉桂；催眠作用
中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-2197(2008)10-0028-02
交泰丸[1]方出自明代的《韩氏医通》，由黄连、肉桂两味药材组成，功能清心除烦、引火归元，交通心肾，对于心肾不交的失眠有显著疗效。现代化学成分及药理研究表明交泰丸中黄连的有效成分是以盐酸小檗碱为主的生物碱类成分，肉桂的有效成分是以桂皮醛为主的挥发油类成分[2]。交泰丸在临床上有广泛的应用，对失眠、心悸等证有显著的疗效，王秋[3]对交泰丸原药材不同配伍比例的镇静催眠作用进行了研究，但对于单味药材提取物尤其是有效部位的配比研究未见报道。本研究采用超临界流体萃取技术等先进的工艺分别得到单味药材的有效部位，并比较了有效部位不同配比对镇静催眠作用的影响进行，选出最佳的配伍比例，为进一步的实验研究和临床应用提供理论依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1药品
中药黄连购于广州市药材公司，经鉴定为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch的干燥根茎；肉桂购于广州市药材公司，经鉴定为樟科植物肉桂CinnamomumcassiaPresl的干燥树皮。地西泮片(安定)，广东华南药业有限公司，产品批号060511；戊巴比妥钠，union进口分装，上海化学试剂采购供应站分装厂提供，产品批号745331。
1.1.2主要仪器
GJ-7902型三光道小鼠活动计数仪，由天津医疗器械修配厂生产；BS1103型Sartorius电子天平，北京赛多利斯天平有限公司生产。
1.1.3实验动物
清洁级昆明种小鼠200只，雌雄各半，质量18~22g，由广东省实验动物中心提供，合格证号：SCXK(粤)2003-0001，粤监证字2005A004。
1.1.4样品的制备
1.1.4.1黄连有效部位的制备
取黄连药材，粉碎，用60%乙醇回流提取3次，每次1h，合并提取液，过滤，回收溶剂，得提取物。提取物加入10倍量0.5%硫酸溶解，滤过，滤液分别用石灰乳调pH＝9,滤过,用盐酸分别调pH1~2,加氯化钠使含盐量达10%,摇匀,静置24h,滤过,沉淀水洗至pH＝5,干燥(60℃)，即得。
1.1.4.2肉桂有效部位的制备
取肉桂药材，粉碎，置超临界CO2萃取装置，以萃取压力13Mpa，萃取温度40℃，解析压力8Mpa，解析温度50℃的条件下以20L/小时流量进行萃取4h，萃取出红棕色的油状物，即得。
1.2实验方法
1.2.1对小鼠自发活动的影响
取小鼠(正式实验前筛除过度兴奋和过度抑制的小鼠)60只，按质量、性别随机分成5组：①正常对照组(生理盐水，0.02mL/g)；②安定组(1mg/kg)；③A配比：黄连提取物/肉桂提取物(1∶1，150mg/kg)；④B配比:黄连提取物/肉桂提取物(2∶1，150mg/kg)；⑤C配比：黄连提取物/肉桂提取物(4∶1，150mg/kg)，每组12只，每天给药1次，连续灌胃7d。末次灌胃前禁食8h，灌胃60min后，将小鼠于7：00~12：00逐一放入GJ-7902型三光道小鼠活动计数仪中，适应环境5min后，记录5min内各小鼠的活动数。
1.2.2对戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的影响
取小鼠60只，分组同上，灌胃除安定组灌胃剂量为2mg/kg外，其余各组灌胃剂量同上。每日给药1次，连续灌胃7d。末次给药后60min，各组小鼠分别腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg(为预实验得到的使80%的小鼠翻正反射不消失的最大剂量)，观察并记录入睡动物数(15min内小鼠翻正反射消失达1min及以上的鼠数作为入睡动物数)，计算入睡率；同时记录注射戊巴比妥钠后反正反射消失的潜伏期。
1.2.3统计方法
用PEMS3.1医学统计软件对数据进行统计分析，计量资料以(±s)表示，用t检验，计数资料用χ2检验。
2实验结果
2.1对小鼠自主活动的影响
结果表明，与正常对照组比较，安定组及有效部位不同配伍比例组成的交泰丸，对小鼠自发活动均有不同程度的抑制作用，以C配比(黄连提取物∶肉桂提取物＝4∶1)的镇静作用最为明显，B配比其次，A配比作用最弱。见表1。
表1交泰丸有效部位不同配比对小鼠
自发活动的抑止作用(±s)
2.2对戊巴比妥钠致小鼠睡眠作用的影响
结果表明，与正常对照组比较，安定组及有效部位不同配伍比例组成的交泰丸入睡动物数和睡眠潜伏期均显著升高，表明安定及有效部位不同配比的交泰丸对阈下催眠剂量的戊巴比妥钠具有协同作用；与安定组比较，A配比组的入睡动物数有统计意义，各配比组的睡眠潜伏期与安定组比较均具有统计意义，镇静催眠作用弱于安定。
表2交泰丸有效部位不同配比对戊巴比妥钠
催眠作用的影响(±s)
组别剂量(g/kg)n
翻正反射入睡动物数(只)入睡率(%)睡眠潜伏期(min)
对照组-12325.012.6±0.7
安定组1×10-31212100.0**3.8±1.2**
A配比组0.1512758.3#10 ......
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