抗菌肽P9—0对口腔感染细菌作用机制的初步探讨(2)
1.8荧光显微镜观察将金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌培养至对数生长期后,调节细菌浓度至1×108 CFU-mL-1。各取500uL这2种细菌的菌液加入EP管中,分别加入500 uL抗菌肽P9-0,使混悬液肽终浓度为MBC浓度,记为金黄色葡萄球菌肽处理组和具核梭杆菌肽处理组,并设不加药物的为未处理组,取500uL金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌组菌液加入EP管中,分别加入500uL肉汤培养基,记为金黄色葡萄球菌未处理组和具核梭杆菌未处理组。在适宜的条件下培养30 min后,取20 uL吖啶橙-溴化乙锭染色液加入各组中,5 min后于荧光显微镜下观察,拍照。
2.结果
2.1 MIC、MBC的测定
在金黄色葡萄球菌组和具核梭杆菌组中,从50.0ug·mL-1开始,以上各浓度均为肉眼观澄清,与阳性对照组一致,这表明抗菌肽P9-0对金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌的MIC均为50.0ug·mL-1。取50.0ug·mL-1及以上各浓度组液体涂板后发现,金黄色葡萄球菌在100.0ug·mL-I及以上浓度组中、具核梭杆菌在50.0ug-mL-1及以上浓度组中的平板上无肉眼可见菌落生长,这表明抗菌肽P9-0对金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌的MBC分别为100.0ug-mL-1和50.0ug·mL-1。
2.2纸片扩散法测定抑菌活性
金黄色葡萄球菌平板(图1A)在恒温培养箱中培养18-24 h后 ......
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