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编号:12792713
抗菌肽P9—0对口腔感染细菌作用机制的初步探讨(2)
http://www.100md.com 2015年6月1日 国际口腔医学杂志 2015年第3期
     1.8荧光显微镜观察

    将金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌培养至对数生长期后,调节细菌浓度至1×108 CFU-mL-1。各取500uL这2种细菌的菌液加入EP管中,分别加入500 uL抗菌肽P9-0,使混悬液肽终浓度为MBC浓度,记为金黄色葡萄球菌肽处理组和具核梭杆菌肽处理组,并设不加药物的为未处理组,取500uL金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌组菌液加入EP管中,分别加入500uL肉汤培养基,记为金黄色葡萄球菌未处理组和具核梭杆菌未处理组。在适宜的条件下培养30 min后,取20 uL吖啶橙-溴化乙锭染色液加入各组中,5 min后于荧光显微镜下观察,拍照。

    2.结果

    2.1 MIC、MBC的测定

    在金黄色葡萄球菌组和具核梭杆菌组中,从50.0ug·mL-1开始,以上各浓度均为肉眼观澄清,与阳性对照组一致,这表明抗菌肽P9-0对金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌的MIC均为50.0ug·mL-1。取50.0ug·mL-1及以上各浓度组液体涂板后发现,金黄色葡萄球菌在100.0ug·mL-I及以上浓度组中、具核梭杆菌在50.0ug-mL-1及以上浓度组中的平板上无肉眼可见菌落生长,这表明抗菌肽P9-0对金黄色葡萄球菌和具核梭杆菌的MBC分别为100.0ug-mL-1和50.0ug·mL-1。

    2.2纸片扩散法测定抑菌活性

    金黄色葡萄球菌平板(图1A)在恒温培养箱中培养18-24 h后 ......
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