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编号:12792717
甲状腺转录因子—2在C57BL/6J小鼠腭突发育过程中的时空变化(2)
http://www.100md.com 2015年6月1日 国际口腔医学杂志 2015年第3期
     PCR产物用1%的琼脂糖凝胶电泳后经扫描并用Bio-Rad软件进行灰度扫描分析。以TTF-2与同一样品内对照管家基因GAPDH产物量的比值表示此样品TTF-2 mRNA近似含量。

    1.2.3 Western blot检测胎鼠腭突组织TTF-2蛋白表达取腭突组织裂解上清液10uL经SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜上,封闭液封闭,4℃过夜,加入1:500稀释的羊抗鼠TTF-2多克隆抗体IgG于室温孵育1 h,PBS洗膜后,1:2 000稀释的AP-兔抗羊IgG于37℃孵育30 min,PBs洗膜后,BCIP/NBT显色。用Bio-Rad软件进行灰度扫描分析。

    1.2.4免疫组织化学方法检测TTF-2在胎鼠腭突中的表达 取E12-E15 C57BL/6J胎鼠腭突,用4%甲醛缓冲液中固定(pH=7.0)24 h后,石蜡包埋,5 um厚连续切片,行免疫组化染色和DAB显色。以小鼠肝脏切片进行同样染色作为阳性对照 ......
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