杨旭东 石 杰 杨骄霞 王桂云 宋高臣 张 杰*

    随着生活水平的提高，肥胖的发病率急剧增高，肥胖导致的代谢紊乱进一步引起的冠状动脉粥样硬化性心脏病、糖尿病、动脉粥样硬化、脂代谢紊乱等疾病增多[1]。脂肪组织不仅是重要的能量储存库，也是重要的内分泌器官，因此控制脂肪细胞的数目，抑制脂肪细胞过度分化，诱导脂肪细胞凋亡成为治疗相关疾病的靶点。食用海藻羊栖菜隶属于褐藻门、马尾藻属。羊栖菜多糖(sargassum fusiforme polysaccha- ride,SFPS)是羊栖菜主要成分之一，研究发现SFPS具有降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗衰老、抗凝血、抗疲劳等作用[2-4]，但SFPS 对脂肪细胞增殖活性的影响及其机制未见报道。本研究就羊栖菜中多糖成分SFPS 对3T3-L1 前脂肪细胞的抑制作用进行分析，并初步探讨其作用机制，为SFPS 进一步应用提供一定的实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    细胞株：3T3-L1 前脂肪细胞购买于美国ATCC公司，在液氮中保存备用。

    药品及试剂：DMEM 高糖培养液、Trizol 和胰蛋白酶购买于美国Gibco 公司，MTT 试剂盒购买于索莱宝有限公司；核苷酸引物购买于上海生工生物技术有限公司；Hoechst33258 试剂盒购买于百浩生物科技有限公司。

    仪器：CO2恒温培养箱为德国Thermo 公司，酶标仪为美国Biotek 公司，倒置显微镜为德国Leica公司，凝胶成像系统为美国Bio-Rad 公司。

    1.2 方法

    1.2.1SFPS的制备用水煮醇沉法提取羊栖菜粗多糖[5]，200 目粉碎羊栖菜，水煮3 次，95%乙醇沉淀，得到深褐色粗多糖，Sevag 法去除蛋白成分，经过SephadexG200 凝胶柱双蒸水洗脱纯化。苯酚-硫酸法测定多糖含量，测得提取的多糖含量为55.13%。

    1.2.2 细胞培养根据参考文献[6]，3T3-L1 前脂肪细胞37 ℃ 5% CO2培养于DMEM 高糖培养基(100 mg/L链霉素、100 IU/L 青霉素、10%胎牛血清) ......