人转化生长因子-β2启动子区低氧反应元件突变体报告基因的构建
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苏燕 李宏伟 张静 王春玲 修瑞娟 包头医学院生物化学与分子生物学教研室 中国协和医科大学中国医学科学院微循环研究所 中国协和医科大学中国医学科学院微循环研究所 煤炭总医院心脏中心 中国协和医科大学中国医学科学院微循环研究所
【摘要】目的:构建人转化生长因子-β2(Transforming growth factor-β2,TGF-β2)启动子区低氧反应元件(hypoxia responsive element,HRE)突变体报告基因。方法:利用重叠延伸PCR技术,以人TGF-β2启动子区报告基因(TGF-β2-pGL3-Basic)为模板,对TGF-β2启动子区(-270bp～+280bp)-114bp、-73bp、-49bp、-4bp和-73/-49 bp位点的低氧反应核心序列5′-RCGTG-3′分别进行定点突变,然后将此突变片段插入荧光素酶报告载体pGL3-Basic进行基因测序。结果:各突变载体的测序结果与预期完全一致。结论:人TGF-β2启动子区HRE突变体报告基因构建成功,为今后进一步研究TGF-β2的低氧调控奠定了基础。
【关键词】 TGF-β 低氧 基因突变 重叠延伸
【基金】中科院知识创新工程(NO.KJCX1-SW-07)
【分类号】Q78
朋青TGF一pZ属于TGF一日家族，具有不同的细胞功能，包括促进细胞增殖、分化及细胞外基质的产生，通过这些作用TGF一田对许多生物学事件如胚胎发生、组织修复及肿瘤生长等发挥重要的调节作用川。低氧通常与上述事件密切相关，Zhang和八上nam即]证明，在人脐静脉内皮细胞中，
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摘要 目的：构建人转化生长因子-茁2(Transforming growth factor-茁2，TGF-茁2)启动HRE)突变体报告基因。方法：利用重叠延伸PCR 技术，以人 TGF-茁2启动子区报启动子区(-270bp~+280bp)-114 bp、-73bp、-49bp、-4bp 和 -73/-49 bp位点的低氧反后将此突变片段插入荧光素酶报告载体 pGL3-Basic 进行基因测序。结果：各突TGF-茁2 启动子区HRE 突变体报告基因构建成功，为今后进一步研究 TGF-茁2 的
关键词：TGF-茁2；低氧；基因突变；重叠延伸
中图分类号：Q784 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2008)01-0001-03
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