DLC-1基因表达对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响
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商延芳 金月玲 徐佳佳 李楠 黄培林 东南大学医学院病理学系 东南大学医学院病理学系 东南大学医学院病理学系 东南大学医学院病理学系 东南大学医学院病理学系
【摘要】目的:研究DLC-1基因对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将DLC-1 shRNA(短发夹状RNA,short hairpin RNA)序列克隆到质粒pGCsi-U6/Neo载体,采用脂质体介导的转染方法将构建的DLC-1 shRNA表达质粒转入结肠癌细胞系LoVo细胞。采用RT-PCR技术和Western Blot技术分别检测LoVo细胞中DLC-1mRNA和蛋白表达水平的变化。Transwell小室人工重组基底膜侵袭转移实验观察LoVo细胞侵袭迁移能力的改变。结果:结肠癌细胞系LoVo细胞表达DLC-1分子。所构建质粒表达载体能有效地干扰LoVo细胞DLC-1 mRNA和蛋白质表达水平;Transwell小室人工重组基底膜侵袭转移实验结果显示,转染后LoVo细胞侵袭转移能力明显增强(p0.05)。结论:结肠癌细胞系LoVo细胞表达DLC-1基因,应用RNAi技术可特异性降低其表达。DLC-1的表达水平与结肠癌细胞侵袭转移相关。
【关键词】 结肠癌细胞株 RNAi LoVo细胞 DLC-
【基金】国家科学自然基金(NO.30471937)
【分类号】R735.35
近年肿瘤流行病学资料显示，随着人民生活水平的提高，饮食结构的改变，结肠癌发病率呈逐年上升趋势。肿瘤侵袭和转移是导致患者预后不良或死亡的主要因素。DLC一1(fre- quently deleted in liver eaneer，DLC一l)是1998年由YUAN等在对多个肝癌细胞系的8号染色体的研究中用再
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摘要 目的：研究 DLC-1 基因对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响。方法：将DLC-1 shRNA(短发夹状 RNA，shorthairpin RNA)序列克隆到质粒 pGCsi-U6/Neo 载体，采用脂质体介导的转染方法将构建的DLC-1 shRNA表达质粒转入结肠癌细胞系LoVo 细胞。采用 RT-PCR 技术和Western Blot 技术分别检测LoVo 细胞中DLC-1mRNA和蛋白表达水平的变化。Transwell小室人工重组基底膜侵袭转移实验观察LoVo 细胞侵袭迁移能力的改变。结果：结肠癌细胞系 LoVo 细胞表达 DLC-1 分子。所构建质粒表达载体能有效地干扰 LoVo 细胞 DLC-1 mRNA 和蛋白质表达水平；Transwell小室人工重组基底膜侵袭转移实验结果显示，转染后 LoVo细胞侵袭转移能力明显增强p<0.05)。结论：结肠癌细胞系 LoVo 细胞表达 DLC-1 基因，应用 RNAi 技术可特异性降低其表达。DLC-1 的表达水平与结肠癌细胞侵袭转移相关。
关键词：结肠癌细胞株；RNAi；LoVo 细胞；DLC-1；
中图分类号：R735.3 文献标识码：A 文章编码：1673-6273(2008)01-0019-03
注：“本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。”
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