人脐带血间充质干细胞体外分离培养及生物学特性研究
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程文广 罗高兴 黄正根 贺伟峰 袁顺宗 陈希炜 吴军 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆市疾病蛋白质组学重点实验室 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆市疾病蛋白质组学重点实验室 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆市疾病蛋白质组学重点实验室 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆市疾病蛋白质组学重点实验室 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆市疾病蛋白质组学重点实验室 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆市疾病蛋白质组学重点实验室 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆市疾病蛋白质组学重点实验室
【摘要】目的:探讨并建立稳定可靠的人脐带血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stem cells,hUCBMSCs)体外分离和培养方法。方法:采用密度梯度离心法分离脐带血单个核细胞,利用MSC易黏附塑料贴壁生长的特性,分离MSC并进行体外扩增培养,观测其形态学特征,绘制不同代数hUCBMSc生长曲线,流式细胞技术检测细胞表面标志物CD29、CD34、CD105、HLA-DR等表达情况。结果:本法可成功、可靠地在体外自hUCB中分离培养出粘附细胞,该细胞在体外培养呈梭形或成纤维样,其指数生长倍增时间约为36h,其细胞表面表达β1整联蛋白CD29、CD105(endoglin),不表达造血细胞标志物CD34以及HLA-DR。结论:人脐带血中存在间充质干细胞,采用优化的实验方法可以提高培养成功率,稳定获得MSC并体外扩增培养。人脐带血可以作为获得间充质干细胞稳定充足的来源。
【关键词】 人脐带血 间充质干细胞 分离培养 生物学特性
【基金】军队“十一五国际合作项目(06H031) 军队十一五专题(06-Z-054) 重庆市自然基金(2005BB5044) 校院基金(SWH2005A010)
【分类号】R329
前言间充质干细胞(meseneh帅al stem eell，MSC)是目前倍受关注的一类具有自我更新能力和多向分化潜能的组织干细胞，可以从胎儿血液、骨髓、肝脏等组织获得。MSC虽来源于中胚层，但在特定条件下，可分化为各胚层的多种细胞或组织11一31，如骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌
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摘要目的：探讨并建立稳定可靠的人脐带血间充质干细胞(human umbilical cord blood mesenchymal stemcells, hUCBMSCs)体外分离和培养方法。方法：采用密度梯度离心法分离脐带血单个核细胞,利用MSC 易黏附塑料贴壁生长的特性，分离MSC 并进行体外扩增培养，观测其形态学特征，绘制不同代数hUCBMSC生长曲线，流式细胞技术检测细胞表面标志物CD29、CD34、CD105、HLA-DR 等表达情况。结果：本法可成功、可靠地在体外自hUCB 中分离培养出粘附细胞，该细胞在体外培养呈梭形或成纤维样，其指数生长倍增时间约为36h，其细胞表面表达茁1 整联蛋白CD29、CD105(endoglin)，不表达造血细胞标志物CD34 以及HLA-DR。结论：人脐带血中存在间充质干细胞，采用优化的实验方法可以提高培养成功率，稳定获得MSC 并体外扩增培养。人脐带血可以作为获得间充质干细胞稳定充足的来源。
关键词：人脐带血；间充质干细胞；分离培养；生物学特性
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