MIC3-EGFP融合蛋白真核表达质粒的构建及其在COS-7细胞中的表达*

http://www.100md.com 2008年3月1日 张　琼　谭　逵　蒋立平　谢荣华　范久波　舒衡平　吴　翔

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     摘要目的：构建以绿色荧光蛋白(greenfluorescenceprotein，GFP)为报告基因的重组表达质粒pEGFP-C2-MIC3 并检测MIC3-EGFP 融合蛋白其在COS-7 细胞中的表达及定位。方法：通过基因重组的方法构建pEGFP-C2-MIC3 重组真核表达质粒，并通过酶切和基因测序鉴定。脂质体法转染体外培养的COS-7 细胞，转染后24h 在活细胞状态下用倒置荧光显微镜直接观察MIC3-EGFP 融合蛋白在COS-7 细胞中的分布。结果：PCR检测，酶切鉴定及测序证实目的基因MIC3 正确连接到pEGFP-C2 的多克隆位点。pEGFP-C2-MIC3重组体转染COS-7 后，在细胞质表达。结论：成功地构建了pEGFP-C2-MIC3 融合蛋白真核表达质粒，在COS-7 细胞中获得表达。

    关键词：刚地弓形虫；MIC3；GFP 表达载体；表达定位

    http://www.100md.com/html/paper/1673-6273/2008/05/08.htm

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