磷酸化对人肝癌细胞株SMMC-7721转醛醇酶活性的影响
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张永玲 郭静 张一鸣 德伟 南京医科大学生物化学与分子生物学系;
【摘要】目的:研究人肝癌细胞株SMMC-7721中转醛醇酶(Transaldolase,TAL)活性变化与磷酸化的关系。方法:SMMC-7721细胞培养,细胞周期同步化后分组加不同浓度(10%、1%)胎牛血清孵育,分别测定不同孵育时间(1、2、4、8h)TAL酶活性;Western blot检测TAL蛋白表达水平。磷酸酶消化法检测TAL活性变化与磷酸化的关系。结果:①人肝癌细胞株SMMC-7721中TAL活性在10%胎牛血清培养时明显高于1%胎牛血清,2、4、8h显著性差异(P0.05)。②不同浓度(10%.1%)胎牛血清孵育2、4、8hTAL蛋白表达水平无显著性差异。③磷酸化消化后TAL活性,与消化前相比呈显著性下降。结论:人肝癌细胞株SMMC-7721中增加血清浓度明显提高TAL活性,酶活性变化与TAL蛋白表达水平无关,提示活性调节发生在蛋白翻译后修饰,其中磷酸化起重要作用。
【关键词】 转醛醇酶活性 细胞周期同步化 磷酸酶消化 翻译后修饰
【基金】江苏省科委应用基础资助项目(BK2001119)
【分类号】R735.7
前言转醛醇酶(Transaldolase,TA L)是磷酸戊糖途径(PentosePhosphate Pathw ay,PPP)中非氧化阶段的关键酶,恶性肿瘤细胞代谢状态及细胞功能发生变化,PPP直接参与癌细胞核酸代谢[1]。本实验室以往研究显示TA L活性的改变与原发性肝癌、胃癌、瘢痕疙瘩形成、睾酮生成等多种疾病
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前言
转醛醇酶(Tmnsaldolase，TAL)是磷酸戊糖途径(PentosePhosphate Pathway，PPP)中非氧化阶段的关键酶，恶性肿瘤细胞代谢状态及细胞功能发生变化，PPP直接参与癌细胞核酸代谢。
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