线虫荧光标记稳定表达系的建立
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周围 华中科技大学生命科学与技术学院;
【摘要】目的:建立稳定表达的PHluorin标记的线虫种系,为囊泡在线虫ALA神经元上分泌机制的研究提供模型。方法:采用了国际先进的线虫转基因技术,将构建的Pida-1IDA-1:PHluorin质粒通过显微注射到线虫的母代,通过筛选后得到稳定表达的种系。结果:通过DIC显微镜整体检测和全内反射荧光成像技术(Tirfm)细胞检测,蛋白表达的位置正确,通过高倍数体式显微镜确定稳定种系中阳性率高达99%。结论:建立了一个稳定表达的荧光标记线虫种系,为进一步在线虫上研究囊泡分泌提供了很好的模型。
【关键词】 显微注射 线虫 全内反射荧光成像技术
【分类号】Q78
前言生物学界对Caenothabditis elegans(秀丽隐杆线虫，简称c elegans，以下简称线虫)的研究始于1%3年。英国科学家syd- ney Brermer选择了线虫II]来作为确定完整的神经系统的较为简单的生物模型。随后，John Sulston经过20年的努力，到90年代中期终于构建了线虫完整的细胞谱
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摘要目的：建立稳定表达的PHluorin标记的线虫种系，为囊泡在线虫ALA神经元上分泌机制的研究提供模型。方法：采用了国际先进的线虫转基因技术，将构建的Pida-1IDA-1:PHluorin质粒通过显微注射到线虫的母代，通过筛选后得到稳定表达的种系。结果：通过DIC显微镜整体检测和全内反射荧光成像技术(Tirfm)细胞检测，蛋白表达的位置正确，通过高倍数体式显微镜确定稳定种系中阳性率高达99%。结论：建立了一个稳定表达的荧光标记线虫种系，为进一步在线虫上研究囊泡分泌提供了很好的模型。
关键词：显微注射；线虫；全内反射荧光成像技术
中图分类号：Q78，Q813 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2008)11-2124-02
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