兔骨髓间充质干细胞的分离、培养与鉴定
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张峰 楚东岭 金发光 王翠莲 第四军医大学唐都医院呼吸科;
【摘要】目的:寻求家兔骨髓间充质干细胞(Bone Mesenchymal Stem cells,BMSCs)培养与分离简单易行的方法,为下一步骨髓间充质干细胞在呼吸系统疾病的应用打好基础。方法:取3个月龄家兔1只,经双侧髂前上棘抽取骨髓共5.0 ml,密度梯度离心法和贴壁筛选法相结合分离、纯化获得BMSCs,倒置差显微镜观察其形态学特性,流式细胞仪鉴定CD34、CD133表达。结果:接种细胞于24小时有少量细胞贴壁,72小时多数细胞可贴壁,贴壁细胞形态多为长梭型或多边形,原代细胞呈集落生长,12-16天可达90%融合,1%胰酶消化后传代培养,培养至第三代备用。流式细胞仪鉴定90%为骨髓间充质干细胞。结论:通过密度梯度离心法与贴壁筛选法可成功分离培养出骨髓间充质干细胞,此方法简单易行,成功率比较高。
【关键词】 骨髓间充质干细胞 细胞培养 兔 梯度离心 流式细胞仪
【分类号】R329.2
前言BMsCs来源于骨髓，取材方便，易于培养，增殖较快，有很强的自我更新和多向分化的能力111。研究表明中胚层来源的MSC可分化为几乎所有3个胚层的细胞。这表明BMSCs是具有多能干细胞特性的细胞群。且自体BMSCs移植可避免免疫排斥反应121，更有研究表明，BMSCs具有免疫抑制
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摘要 目的：寻求家兔骨髓间充质干细胞(Bone Mesenchymal Stem Cells，BMSCs)培养与分离简单易行的方法，为下一步骨髓间充质干细胞在呼吸系统疾病的应用打好基础。方法：取3个月龄家兔1只，经双侧髂前上棘抽取骨髓共5.0 ml，密度梯度离心法和贴壁筛选法相结合分离、纯化获得BMSCs，倒置差显微镜观察其形态学特性，流式细胞仪鉴定CD34、CD133表达。结果：接种细胞于24小时有少量细胞贴壁，72小时多数细胞可贴壁，贴壁细胞形态多为长梭型或多边形，原代细胞呈集落生长，12-16天可达90%融合，1%胰酶消化后传代培养，培养至第三代备用。流式细胞仪鉴定90%为骨髓间充质干细胞。结论：通过密度梯度离心法与贴壁筛选法可成功分离培养出骨髓间充质干细胞，此方法简单易行，成功率比较高。
关键词：骨髓间充质干细胞；细胞培养；兔；梯度离心；流式细胞仪
中图分类号：R329.2 文献标识码：B 文章编号：1673-6273(2008)12-2236-02
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