CHO-K1细胞中基因瞬时转染的条件优化
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杨淑梅 杨晓梅 山西忻州师范学院;上海市安图医院;
【摘要】目的:以CHO-K1细胞为宿主基因瞬时转染条件的优化。方法:以GFP(Green Fluorescence Protein)为报告基因,考察了DNA:PEI比例、DNA用量及血清的加入对CHO-K1细胞的转染效率和细胞数目的影响。结果:DNA:PEI=1:2(w/w)、2gDNA/106cells时,转染结果最优;血清的加入可降低细胞转染效率。结论:在CHO-K1细胞中进行瞬时转染的最佳条件为DNA:PEI=1:2(w/w)、2gDNA/106cells,及血清的加入抑制细胞转染。
【关键词】 CHO-K细胞 瞬时基因转染 优化
【分类号】Q78
前言基因瞬时表达是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到染色体上,较短时间内就可获得基因的表达产物,但随着细胞的分裂增殖,这种外源基因最终会消失,其持续时间约为几天到两周。通常意义上所说的蛋白质表达多指稳定的基因表达技术。稳定的基因表达技术是
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摘要 目的：以CHO-K1细胞为宿主基因瞬时转染条件的优化。方法：以GFP(Green Fluorescence Protein)为报告基因，考察了DNA：PEI比例、DNA用量及血清的加入对CHO-K1细胞的转染效率和细胞数目的影响。结果：DNA：PEI=1:2(w/w)、2gDNA/106cells时，转染结果最优；血清的加入可降低细胞转染效率。结论：在CHO-K1细胞中进行瞬时转染的最佳条件为DNA：PEI=1:2(w/w)、2gDNA/106cells，及血清的加入抑制细胞转染。
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