大鼠E12.5胰腺间质细胞原代培养及鉴定
胚胎胰腺,间充质细胞,免疫荧光,显微分离,鼠尾胶,大鼠胚胎,组织块培养,上皮细胞
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仲新村 德伟 南京医科大学生物化学与分子生物学系;
【摘要】目的:体外分离培养大鼠胚胎胰腺间质细胞(pancreas mesenchymal cells)。方法:以孕12.5天(E12.5)的大鼠胚胎为组织来源,通过显微分离得到E12.5的胚胎胰腺,在鼠尾胶原包覆的六孔板内进行组织块培养,观察培养过程中胰芽的形态变化,间质细胞的长出,并用细胞免疫荧光的方法对间质细胞进行了鉴定。结果:显微分离得到了胚胎胰腺,为间质细胞群包绕着上皮细胞团的结构,培养第二天即发现间质细胞的长出,培养第四天时得到间质细胞群,免疫荧光鉴定为vimentin阳性的间质细胞。结论:本方法通过大鼠E12.5胚胎胰腺显微分离,体外培养出原代胚胎胰腺间质细胞,为进一步研究大鼠胰腺间质细胞的功能提供实验平台。
【关键词】 胚胎胰腺 原代培养 间充质细胞 免疫荧光 间质细胞 显微分离 鼠尾胶 大鼠胚胎 组织块培养 上皮细胞
【基金】国家自然科学基金(30670781)
【分类号】R587.1
前言近年来,糖尿病呈现发病率逐步增高和发病年轻化的趋势。目前,胰岛素治疗仍然是主要的治疗方法,但患者的生活质量并没有显著改善,而且胰岛素治疗也不能阻止一些糖尿病并发症的发生和恶化。胰岛细胞替代疗法是近年研究的热点。骨髓间质干细胞可以诱导后分化为可以分泌胰岛
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摘要目的：体外分离培养大鼠胚胎胰腺间质细胞(pancreasmesencbymal cells)。方法：以孕12.5天(E12.5)的大鼠胚胎为组织来源，通过显微分离得到E12.5的胚胎胰腺，在鼠尾胶原包覆的六孔板内进行组织块培养，观察培养过程中胰芽的形态变化，间质细胞的长出，并用细胞免疫荧光的方法对间质细胞进行了鉴定。结果：显微分离得到了胚胎胰腺，为间质细胞群包绕着上皮细胞团的结构，培养第二天即发现间质细胞的长出，培养第四天时得到间质细胞群，免疫荧光鉴定为vimentin阳性的间质细胞。结论：本方法通过大鼠E12.5胚胎胰腺显微分离，体外培养出原代胚胎胰腺间质细胞，为进一步研究大鼠胰腺间质细胞的功能提供实验平台。
关键词：胚胎胰腺；原代培养；间充质细胞；免疫荧光
中图分类号：R587.1 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)06-1071-02
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