敲减VEGFR-1基因抑制乳腺癌细胞增殖的研究
siRNA,MCF-细胞,SHZ-细胞,血管内皮生长因子受体,基因治疗
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王明明 葛银林 李泉 张金玉 欧阳奇琦 青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室;攀枝花市妇幼保健院;
【摘要】目的:体外水平探讨利用化学修饰的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减VEGFR-1基因治疗乳腺癌的可行性和特异性。方法:采用阳离子脂质Lipofectamine2000TM作为转染试剂将同时针对人和大鼠VEGFR-1基因的小干扰RNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7和大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88,敲减VEGFR-1基因的表达;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,半定量RT-PCR,蛋白印迹试验等检测VEGFR-1mRNA和蛋白表达及细胞增殖变化。结果:靶向VEGFR-1基因的siRNA转染细胞后,两种细胞增殖均被抑制,同浓度两细胞株指标无显著差异,VEGFR-1mRNA和蛋白的表达均明显降低。各对照组指标则无显著变化。结论:化学修饰的siRNA介导的RNAi能成功敲减VEGFR-1基因的表达、抑制乳腺癌细胞增殖。
【关键词】 siRNA MCF-细胞 SHZ-细胞 血管内皮生长因子受体 基因治疗
【基金】青岛市科技局计划项目(No.07-2-1-7-nsh)
【分类号】R737.9
研究认为,血管内皮生长因子受体1(vascular endothelialgrowth factor receptor1,VEGFR-1)在血管内皮和部分肿瘤细胞,特别是乳腺癌细胞上特异性表达,且表达量明显高于其它受体[1],肿瘤细胞分泌VEGF以旁分泌和自分泌的方式作用于肿瘤细胞和血管内皮细胞上的VEGFR-1,在肿瘤及肿
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摘要 目的：体外水平探讨利用化学修饰的小干扰RNA(small interferingRNA，siRNA)敲减VEGFR-1基因治疗乳腺癌的可行性和特异性。方法：采用阳离子脂质Lipofectamine2000TM作为转染试剂将同时针对人和大鼠VEGFR-1基因的小干扰RNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7和大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88，敲减VEGFR-1基因的表达；采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法，半定量RT-PCR，蛋白印迹试验等检测VEGFR-1mRNA和蛋白表达及细胞增殖变化。结果：靶向VEGFR-1基因的siRNA转染细胞后，两种细胞增殖均被抑制，同浓度两细胞株指标无显著差异，VEGFR_1mRNA和蛋白的表达均明显降低。各对照组指标则无显著变化。结论：化学修饰的siRNA介导的RNAi能成功敲减VEGFR-1基因的表达、抑制乳腺癌细胞增殖。
关键词：siRNA；MCF-7细胞；SHZ-88细胞；血管内皮生长因子受体1；基因治疗
中图分类号：R737.9 Q753，R392.11 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)10-1891-04
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