靶向bmi-1真核表达载体的构建及对SW480细胞的增殖研究
bmi-基因,RNA干扰,结肠癌细胞,转染,短发夹RNA
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汪云霞 魏亚明 王晓华 朱晓莹 广州医学院生化教研室;广州市第一人民医院中心实验室;
【摘要】目的:构建针对原癌基因bmi-1的shRNA逆转录病毒表达载体,检测它对大肠癌细胞株SW480增殖的影响。方法:利用载体介导的RNA干扰技术,设计、合成靶向bmi-1基因、编码短发夹RNA的寡核苷酸序列,并设计无义对照序列,构建重组载体pSIREN-bmi-1及pSIREN-bmi-1-c,载体经脂质体2000介导转染SW480细胞,经MTT检测,观察bmi-1表达受抑后对细胞增殖的影响。结果:成功构建了针对bmi-1基因的shRNA表达载体。结论:针对bmi-1基因的shRNA表达载体能够明显抑制结肠癌细胞SW480的增殖能力。
【关键词】 bmi-基因 RNA干扰 结肠癌细胞 转染 短发夹RNA
【基金】广州市科技计划项目(2007J1-C0091)
【分类号】Q78
前言大肠癌是消化系统常见肿瘤,极大危害人类健康,其发病率和死亡率逐年上升。目前大肠癌治疗失败的主要原因是病情较晚及术后局部复发、远处转移。如何采取更有效的治疗措施、提高疗效以降低复发率、死亡率,提高患者的生存质量,是迫切需要解决的问题。RNAi技术是近年兴起的
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摘要目的：构建针对原癌基因bmi-1的shRNA逆转录病毒表达载体，检测它对大肠癌细胞株SW480增殖的影响。方法：利用载体介导的RNA干扰技术，设计、合成靶向bmi-1基因、编码短发夹RNA的寡核苷酸序列，并设计无义对照序列，构建重组载体pSIREN-bmi-1及pSIREN-bmi-1-c，载体经脂质体2000介导转染SW480细胞，经MTT检测，观察bmi-1表达受抑后对细胞增殖的影响。结果：成功构建了针对bmi-1基因的shRNA表达载体。结论：针对bmi-1基因的shRNA表达载体能够明显抑制结肠癌细胞SW480的增殖能力。
关键词：bmi-1基因；RNA干扰；结肠癌细胞；转染；短发夹RNA
中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)12-2270-03
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