BDNF RNA干扰在多巴胺能PCI2细胞凋亡中的作用研究
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摘要目的：探讨脑源性神经营养因子(bmin derived neurotrophic factor，BDNF)在PC12细胞凋亡中的作用。方法：设计并合成针对BDNF mRNA序列的小片段干扰RNA(siRNA)，利用lipofectamine 2000将siRNA转染入PC12细胞中或给与6.0HDA损伤，给与/不给予BDNF蛋白保护，采用定量PCR和免疫荧光法检测BDNF mRNA和蛋白表达水平；采用上清液乳酸脱氢酶(LDH)释放量测定和流式细胞仪法检测siRNA对细胞凋亡的影响。结果：转染siRNA的细胞的BDNF mRNA的表达量比正常组细胞减少73%，而转染作为对照的scrambled siRNA的细胞的BDNF mRNA的表达没有明显变化。BDNF RNA干扰与6-OHDA神经毒性一样可诱导PC12细胞的LDH释放和细胞凋亡。给予BDNF蛋白保护后细胞毒性减轻。结论：BDNF基因下调可以导致PC12细胞的凋亡，BDNF蛋白对PC12细胞有保护作用，为进一步进行动物体内研究奠定了基础。
关键词：帕金森病；脑源性神经营养因子；siRNA；PC12细胞；凋亡
中图分类号：R-749.5 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)13-2417-04
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