红藻氨酸诱导原代培养皮质神经元兴奋毒中p21变化及机制的研究

http://www.100md.com 2009年7月1日 贾玉红　马天舒　姜　妙　孙　杰　李淑艳　贾弘禔

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    贾玉红 马天舒 姜妙娜 孙杰 李淑艳 贾弘禔 大连医科大学病理生理学教研室;大连市中医研究所;北京大学医学部生物化学与分子生物学系;

    【摘要】目的:探讨p21在红藻氨酸诱导的原代培养皮质神经元兴奋毒中的变化及可能机制。方法:原代培养大鼠皮质神经元经红藻氨酸(KA)处理24h后,激光共聚焦显微镜透射光下观察细胞损伤,应用Western blotting方法检测p21与p53蛋白表达的变化,用染色质免疫共沉淀(ChIP)-聚合酶链反应(PCR)方法检测p53与p21基因启动子上p53反应元件1结合情况。结果:KA处理后神经元明显损伤,部分细胞胞体缩小、变圆,突起变短、减少或消失,p21与p53蛋白表达上调,并且p53与p21基因启动子上的p53反应元件1结合增加。结论:在KA诱导的原代培养皮质神经元兴奋毒作用中p21蛋白表达上调,而p53直接参与了p21的激活。

    【关键词】 红藻氨酸(KA) 神经元 兴奋毒 p p

    【分类号】R114

    前言红藻氨酸(kainate或kainic acid,KA)是一种谷氨酸结构类似物,给大鼠全身或脑内注射KA可引起持续性癫痫和癫痫介导的脑损害。KA诱导神经细胞兴奋毒作用是通过激活AM-PA/KA受体引起的,是目前常用的体内和体外研究细胞兴奋毒性的模型[1]。近年研究发现,高度分化的有丝分裂后
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     摘要目的：探讨p21在红藻氨酸诱导的原代培养皮质神经元兴奋毒中的变化及可能机制。方法：原代培养大鼠皮质神经元经红藻氨酸(KA)处理24h后，激光共聚焦显微镜透射光下观察细胞损伤，应用Westem blotting方法检测p21与p53蛋白表达的变化，用染色质免疫共沉淀(ChIP)-聚合酶链反应(PCR)方法检测p53与p21基因启动子上p53反应元件1结合情况。结果：KA处理后神经元明显损伤，部分细胞胞体缩小、变圆，突起变短、减少或消失，p21与p53蛋白表达上调，并且p53与p21基因启动子上的p53反应元件1结合增加。结论：在KA诱导的原代培养皮质神经元兴奋毒作用中p21蛋白表达上调，而p53直接参与了p21的激活。

    关键词：红藻氨酸(KA)；神经元；兴奋毒；p21；p53

    中图分类号：Q291，Q593.2，Q95-3 文献标识码：A 文章编号：1673-6273(2009)13-2440-03

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