基于上转磷光颗粒的AFP免疫层析定量检测
上转磷光技术,免疫层析测定,甲胎蛋白,定量测定
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赵露晶 周蕾 方菲 孙红英 杨瑞馥 沈鹤柏 上海师范大学生命与环境科学学院;军事医学科学院微生物流行病研究所;
【摘要】目的:建立了上转磷光免疫层析快速定量检测AFP的方法,用于原发性肝癌的诊断。方法:利用上转磷光标记的双抗夹心免疫层析技术检测血清中AFP的含量。将AFP单克隆抗体分别标记上转磷光颗粒并包被硝酸纤维膜,制成免疫层析检测试纸。评价该试纸的灵敏度、特异性和精密度。并通过临床50例血清样本,探讨上转磷光技术与化学发光检测方法的一致性。结果:该方法能在20min内完成,检测灵敏度达5ng/ml。浓度范围从5-1000ng/ml作标准曲线,呈现较好的线性。通过三组平行实验探讨其精密度,变异系数都在10%以内。应用于其它肿瘤标志物如CEA、CA199、AFU和NSE的检测,无交叉反应。与化学发光相比,决定系数R2=0.9692,一致性较好。结论:该方法简便、快速、廉价,可以实现定量,尤其适合基层门诊和体检现场使用。
【关键词】 上转磷光技术 免疫层析测定 甲胎蛋白 定量测定
【基金】上海市科学技术委员会(0752nm028,0952nm05500和08TC140600)项目资助
【分类号】R735.7
前言原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一,在恶性肿瘤的死亡排列中居第三,仅次于胃癌和肺癌[1-2],是一种严重威胁人民身体健康的疾病。由于肝癌发病率高,及起病隐匿、恶性程度高、病情变化快[3],使得早期诊断、早期发现和早期治疗成为降低肝癌死亡率的关键。甲胎蛋白(AFP)作
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摘要 目的:建立了上转磷光免疫层析快速定量检测AFP的方法。用于原发性肝癌的诊断。方法:利用上转磷光标记的双抗夹心免疫层析技术检测血清中AFP的含量。将AFP单克隆抗体分别标记上转磷光颗粒并包被硝酸纤维膜,制成免疫层析检测试纸。评价该试纸的灵敏度、特异性和精密度。并通过临床50例血清样本,探讨上转磷光技术与化学发光检测方法的一致性。结果:该方法能在20min内完成,检测灵敏度达5ng/ml。浓度范围从5-1000ng/ml作标准曲线,呈现较好的线性。通过三组平行实验探讨其精密度,变异系数都在10%以内。应用于其它肿瘤标志物如CEA、CA199、AFU和NSE的检测,无交叉反应。与化学发光相比。决定系数R2=0.9692,一致性较好。结论:该方法简便、快速、廉价,可以实现定量,尤其适合基层门诊和体检现场使用。
关键词:上转磷光技术;免疫层析测定;甲胎蛋白;定量测定
中图分类号:R730.45,R446.6 文献标识码:A 文章编号:1673—6273(2009)15—2907—03
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