pEGFP-ORF2质粒在Vero细胞中的有效表达
荧光表达,Vero细胞系,脂质体转染,绿色荧光蛋白,接种密度,蛋白表达,细胞密度,表达量
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白利利 杨慧兰 华南理工大学生物科学与工程学院;广州军区广州总医院皮肤科;
【摘要】目的:确立pEGFP-ORF2质粒在不同细胞密度,不同转染时间,及血清存在与否时在细胞中的有效表达,为进一步研究HSV-2LATORF2对细胞的作用,及阐明HSV-2潜伏复发机制打下基础。方法:采用脂质体法将pEGFP-ORF2与pEGFP-C2两个真核表达载体转染Vero细胞,观察荧光蛋白表达。结果:有无血清对转染效果无明显差异。在细胞密度为4.0×104cells/ml,转染后84hEGFP表达量较其它条件下高,且在相同条件下pEGFP-ORF2与pEGFP-C2的表达无明显差异。结论:血清对表达效果的影响不大,细胞的接种密度及转染时间对转染有明显作用,以荧光蛋白作为标签鉴定蛋白表达的方法切实可行。
【关键词】 荧光表达 Vero细胞系 脂质体转染 绿色荧光蛋白 接种密度 质粒 蛋白表达 细胞密度 表达量 有效表达
【基金】全军医学科学技术研究“十一五”计划课题项目(06J008)
【分类号】Q782
前言单纯疱疹病毒2型为人类病毒性疾病的常见病原体之一,主要引起生殖器疱疹[1],其感染后在神经节中长期潜伏,难以治愈。目前疱疹病毒潜伏感染的机制尚未明确,给药物的研发带来困难。而HSV-2的潜伏相关转录体是病毒在潜伏期间唯一大量存在的基因组转录产物,被认为在病毒的潜
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摘要目的：确立pEGFP-ORF2质粒在不同细胞密度，不同转染时间，及血清存在与否时在细胞中的有效表达，为进一步研究HSV-2LAT ORF2对细胞的作用，及阐明HSV-2潜伏复发机制打下基础。方法：采用脂质体法将pEGFP-ORF2与pEGFP-C2两个真核表达载体转染Vero细胞，观察荧光蛋白表达。结果：有无血清对转染效果无明显差异。在细胞密度为4.0×104cells/ml，转染后84h EGFP表达量较其它条件下高，且在相同条件下pEGFP-ORF2与pEGFP-C2的表达无明显差异。结论：血清对表达效果的影响不大，细胞的接种密度及转染时间对转染有明显作用，以荧光蛋白作为标签鉴定蛋白表达的方法切实可行。
关键词：荧光表达；Vero细胞系；脂质体转染
中图分类号：Q782；R752.11 文献标识码：B 文章编号：1673-6273(2009)16-3046-03
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