脂肪基质细胞脂向分化过程中MicroRNA-21的表达变化
microRNA-,microRNA芯片,实时定量PCR
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王伟新 张勇 李晓宇 龙洁 田卫东 汤炜 王杭 郑晓辉 刘磊 四川大学口腔疾病研究国家重点实验室;四川大学华西口腔医院口腔颌面外科;
【摘要】目的:了解脂肪基质细胞(ADSCs)在脂向分化过程中MicroRNA-21(miRNA-21)表达变化情况。方法:从8只出生30d雄性体健SD幼鼠体内取出脂肪,采用密度梯度离心结合贴壁培养法获得了纯度高的脂肪基质细胞,采用脂向诱导液对第3代的脂肪基质细胞进行诱导培养,并以未诱导的细胞为对照。成脂诱导培养液[DMEM培养液中加入地塞米松(1μmol.L-1)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(0.5mmol.L-1)、胰岛素(10mg.L-1)]。应用microRNA芯片技术检测脂肪基质细胞脂向诱导后7d和未诱导microRNA-21的表达差异。采用实时定量PCR检测microRNA-21在脂肪基质细胞脂向分化前后表达量变化。结果:经显微镜下观察、油红O染色及PPARγ免疫细胞化学染色检测证实脂肪基质细胞已经脂向分化,miRNA芯片及实时定量PCR结果均表明miRNA-21在脂肪基质细胞体外脂向分化过程中表达显著下调。结论:miRNA-21在脂肪基质细胞脂向分化后的表达有显著降低,可能参与调控ADSCs的脂向分化过程。
【关键词】 microRNA- 脂肪基质细胞 脂向分化 microRNA芯片 实时定量PCR
【基金】国家自然科学基金(30772422) 教育部新世纪优秀人才支持计划(JS20071108506525) 四川省杰出青年学科带头人培养计划(06ZQ026-008) 四川省支撑计划项目(2009FZ0074)
【分类号】Q95-3
前言脂肪组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理,对病损组织结构、功能的修复与重建进行研究开发,被认为最有可能应用于临床的组织工程学研究方向。作为组织工程研究的关键要素,种子细胞来源是组织工程的首要问题。脂肪基质细胞(Adipose tissue-derived stromal cells,ADSCs
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前言
脂肪组织工程是应用细胞生物学和工程学的原理，对病损组织结构、功能的修复与重建进行研究开发，被认为最有可能应用于临床的组织工程学研究方向。作为组织工程研究的关键要素，种子细胞来源是组织工程的首要问题。脂肪基质细胞(Adipose tissue-derived stromal cells，ADSCs)具有贮备量大、取材方便、获取细胞多和易于分离纯化等优势.近年来已成为研究热点，被认为是最有希望实现临床化和产业化的组织工程种子细胞来源。ADSCs在特定条件下可以向脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞、血管内皮细胞、神经细胞和心肌细胞等多个方向分化，但迄今为止，触发和控制ADSCs脂向分化的调控机制仍未明了。
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