肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬体与结核分枝杆菌相互作用的研究
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郭旭光 马越云 周珊 刘家云 苏明权 郝晓柯 第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心;
【摘要】目的:检测LC3在肺泡Ⅱ型上皮细胞A549上的表达情况,及结核分枝杆菌刺激后对其表达的影响,探讨自噬在结核分枝杆菌感染上皮细胞中所起的作用。方法:体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,在结核分枝杆菌感染A549细胞0h,24h分别提取RNA,采用RT-PCR的方法检测LC3mRNA的表达情况。采用凋亡坏死染色试剂盒在结核分枝杆菌感染24h后检测对照组,3-MA组,MTB组和3-MA+MTB组的细胞坏死情况。在结核分枝杆菌感染A549细胞4h,8h,16,24h采用Non-Radioactive Cytocity Assay的方法检测对照组,3-MA组,MTB组和3-MA+MTB组上清液LDH的OD值。结果:LC3在肺泡Ⅱ型上皮细胞显著表达,结核分枝杆菌感染后LC3表达降低。细胞凋亡和坏死染色结果显示空白组和3-MA组没有明显差异(P0.05),MTB组和3-MA+MTB组有明显差异(P0.05)。LDH检测显示MTB组和3-MA+MTB组上清液LDH的OD值数据两两之间有明显差异(P0.05)并且有时间依赖性。结论:肺泡II型上皮细胞自噬体在抵抗结核分枝杆菌的感染过程中起一定的作用。
【关键词】 LC 结核分枝杆菌 肺泡II型上皮细胞 -MA 自噬体
【基金】国家自然科学基金(面上项目)(30872358)
【分类号】R52
前言自噬(autophagy)作用被认为是清除细胞内结核杆菌的一种有效的机制[1,2,3]。自噬体(autophagosome)是在某些刺激因素的作用下,一种来源不明的单层膜凹陷形成杯状双层膜,逐渐延伸包裹需要降解的细胞质和细胞器,形成有双层膜的结构;其通过细胞骨架微管网络系统被运输至溶酶
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前言
自噬(autophagy)作用被认为是清除细胞内结核杆菌的一种有效的机制。自噬体(autophagosome)是在某些刺激因素的作用下，一种来源不明的单层膜凹陷形成杯状双层膜，逐渐延伸包裹需要降解的细胞质和细胞器，形成有双层膜的结构；其通过细胞骨架微管网络系统被运输至溶酶体内并与溶酶体融合，形成自噬溶酶体；然后溶酶体经多种蛋白酶的作用降解囊内容物。
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