葡萄糖和胰岛素对血管内皮细胞中microRNA-21的表达影响
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刘显庆 姜德谦 罗玉梅 彭振宇 懂莉妮 嵇利亚 王镇河 中南大学湘雅二医院心血管内科;龙岗区人民医院心血管内科;
【摘要】目的:研究miRNA-21和程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在不同浓度葡萄糖或胰岛素培养血管内皮细胞中的表达情况,探讨miRNA-21对内皮细胞凋亡功能的影响。方法:用不同浓度D-葡萄糖(5.5、11、22及33mM)和胰岛素(0、1、10、50、100及1000nM)分别干预人脐静脉内皮细胞(HUVECs),2天后收集细胞用实时荧光定量RT-PCR方法检测细胞中miRNA-21及PDCD4的mRNA表达情况,用蛋白印迹方法检测PDCD4在细胞中的表达变化。结果:与5.5mM葡萄糖对照组相比,高葡萄糖浓度组(11、22及33mM)中HUVECs的miRNA-21随着葡萄糖浓度的增加表达明显降低(p0.01);PDCD4的蛋白表达增加(p0.05),但PDCD4的mRNA表达无差异(p0.05)。与0nM胰岛素组相比,10、50、100、1000nM胰岛素组细胞中miRNA-21表达下降(p0.05),PDCD4的蛋白表达增加(p0.01),1000nM组miRNA-21表达降低程度和PDCD4的蛋白表达增加程度最为明显(p0.05),但不同浓度胰岛素对PDCD4的mRNA表达无差异(p0.05)。1nM胰岛素对HUVECs中miRNA-21表达和PDCD4的蛋白表达无差异(p0.05)。结论:高浓度葡萄糖或胰岛素可影响HUVECs中miRNA-21和PDCD4蛋白的表达,miRNA-21与PDCD4相关信号途径调控可能是高糖和高胰岛素影响内皮细胞凋亡的重要机制之一。
【关键词】 microRNA- 程序性细胞死亡因子 凋亡 血管内皮细胞 葡萄糖 胰岛素
【基金】深圳市重点资助项目(200643)资助
【分类号】R363
前言目前研究认为,MicroRNAs广泛参与了多种细胞的功能调控过程,已成为近年各生物领域研究的热点[1]。microRNA-21(miRNA-21)作为一种特殊的microRNA,在绝大多数肿瘤组织或细胞中明显表达上调,显示出显著的抗凋亡作用,在肿瘤领域尤其引人关注[2]。近年发现,miRNA-21在心肌细
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前言
目前研究认为，MicroRNAs广泛参与了多种细胞的功能调控过程，已成为近年各生物领域研究的热点。microRNA-21(miRNA-21)作为一种特殊的microRNA，在绝大多数肿瘤组织或细胞中明显表达上调，显示出显著的抗凋亡作用，在肿瘤领域尤其引入关注。近年发现。miRNA-21在心肌细胞及血管平滑肌细胞中表达变化参与了细胞的凋亡、增殖及氧化应激反应等多种病理过程的调控。有文献报道，miRNA-21在血管内皮细胞中也存在miRNA-21的丰富表达，但它在血管内皮细胞中的作用目前罕见相关研究报道。糖尿病患者容易发生动脉粥样硬化病变。而血管内皮细胞凋亡增加导致内皮细胞屏障破坏是引起动脉粥样硬化病变发生、发展的重要环节。MiR-NA-21表达变化与细胞凋亡关系密切，我们推测血管内皮细胞中miRNA-21的表达变化也可能参与了糖尿病状态下细胞凋亡的调控过程。本研究用不同浓度D-葡萄糖和胰岛素作用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)模拟糖尿病状态下血管内皮环境，探讨葡萄糖和胰岛素对血管内皮细胞中miRNA-21的表达影响，为糖尿病状态下血管内皮细胞损害的机制研究提供新的思路。
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