ABCAl中间缺失突变体的构建及其抗砷性研究

http://www.100md.com 2010年4月15日 张晓菲 谭晓华 程建兵等

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     摘 要 目的：构建缺失ABCAl，ABCAl蛋白胞外第一环第264-520位氨基酸密码子的基因，并真核表达检测其抗砷性变化。方法：应用重叠区扩增基因拼接法的原理，在拼接延伸后，再进行一次PCR扩增，得到缺失第264-520位氨基酸密码子的ABCAl基因，克隆至pcDNA3.1/V5-His真核表达载体。通过激光共聚焦检测突变体细胞定位，MTT加砷后检测突变体生存率变化。结果：成功构建缺失ABcAl蛋白胞外第一环第264，520位氨基酸密码子的基因。共聚焦显微镜观察突变体定位于细胞膜上，随机区组方差分析结果显示ABcAl突变体生存率明显低于ABCAl野生型。结论：ABCAl胞外第一环缺失突变后基本丧失抗砷功能。

    http://www.100md.com/html/paper/1673-6273/2010/08/06.htm

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