用于活体影像技术稳定表达荧光素酶的肺癌细胞系的建立
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郑国兵 刘启才 李晓艳 周问渠 彭燕 李冰 广州医学院实验医学研究中心;中山大学附属第一医院肾内科;
【摘要】目的:建立稳定表达萤火虫荧光素酶的人肺癌细胞系并进行体外验证。方法:亚克隆萤火虫荧光素酶基因到真核表达载体pRc/CMV2上,构建重组质粒pRc/CMV2-luc+,转染到肺癌细胞株spc-a-1,经过G418筛选获得单细胞抗性克隆。抗性克隆连续传代,并通过荧光素酶活性检测筛选出高水平表达荧光素酶的稳定细胞克隆,在体外检测细胞的生物发光能力与细胞数量的相关性。结果:构建的pRc/CMV2-luc+真核表达质粒转染spc-a-1细胞后,经G418筛选出多个抗性克隆;传代至40代时确定有3株细胞的荧光素酶活性最高;活体影像系统体外检测证实阳性细胞株发光强度与数量呈正相关。结论:结果表明成功构建了稳定表达萤火虫荧光素酶的spc-a-1细胞系。
【关键词】 细胞克隆 荧光素酶 肺癌细胞spc-a- G
【基金】广东省自然科学基金(06301124) 广州市属高校科技项目(61093)
【分类号】R734.2
前言癌症极大的威胁着人类的健康[1],根据卫生部公布的统计资料,我国肺癌的死亡率已经高达30.83/10万,目前成为首位恶性肿瘤死亡原因。因此,对肺癌发生、发展和转移的研究已成为当前的热点之一,利用免疫缺陷动物建立人类肿瘤动物模型正是研究肿瘤生物学特性和抗肿瘤实验治疗
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前言
癌症极大的威胁着人类的健康，根据卫生部公布的统计资料，我国肺癌的死亡率已经高达30.83/10万，目前成为首位恶性肿瘤死亡原因。因此，对肺癌发生、发展和转移的研究已成为当前的热点之一，利用免疫缺陷动物建立人类肿瘤动物模型正是研究肿瘤生物学特性和抗肿瘤实验治疗的重要工具。
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