培养破骨细胞扫描电镜样本制备方法的探讨
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白生宾 陈红香 钟近洁 冯树梅 李甜 罗学港 新疆医科大学基础医学院组胚教研室;中南大学湘雅医学院人体解剖与神经生物学系;新疆维吾尔自治区人民医院妇科;
【摘要】目的:探讨体外培养的破骨细胞在自制牛股骨磨片和细胞爬片中扫描电镜制备方法。方法:实验分两组,一组采用新鲜牛股骨制备成5mm×5mm大小的薄片,作为共培养之需;另一组,采用盖玻片制成5mm×5mm的细胞爬片。分别以5×104种植于骨磨片和爬片,培养5天后进行扫描电镜的制备并观察。结果:破骨细胞在牛骨磨片表面生长良好,充分伸展,有细胞突起伸入到实验组材料深部,并形成骨陷窝;在爬片表面生长的破骨细胞,细胞生长良好,粘附性强,细胞之间相互连接较紧密,细胞表面突起明显。结论:牛股骨磨片与破骨细胞在体外相容良好,材料有利于破骨细胞的生长及细胞功能的表达,而破骨细胞爬片更适于细胞外形的观察。将两种方法结合既能反映破骨细胞的形态结构又能展示其破骨功能。
【关键词】 破骨细胞 骨磨片 爬片 扫描电镜
【基金】国家自然基金资助项目(30860249)
【分类号】R329
1前言近年来,随着地方性氟中毒机制与氟骨症研究的不断深入,从骨组织工程的角度探讨为氟骨症的研究提供了一定思路和途径。为了更好的从细胞和分子水平探讨氟骨症的发病机制,本课题组在前期工作中一直着力于破骨细胞和成骨细胞的相互作用研究。目前,对破骨细胞的形态学基础研
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1 前言
近年来，随着地方性氟中毒机制与氟骨症研究的不断深入，从骨组织工程的角度探讨为氟骨症的研究提供了一定思路和途径。为了更好的从细胞和分子水平探讨氟骨症的发病机制，本课题组在前期工作中一直着力于破骨细胞和成骨细胞的相互作用研究。目前，对破骨细胞的形态学基础研究还不够完善，本研究以RAW264.7细胞株为研究对象，为破骨细胞珠的选择提供一定的实验基础，并对该细胞的扫描电镜方法进一步探讨。为了能在扫描电镜下准确地反映出破骨细胞的生长情况与形态变化，我们采用与牛股骨共培养和细胞爬片的方法，在扫描电镜下观察细胞的生长情况与形态变化，并对样品前的准备工作进行细节方面和经验总结，以期详尽探讨对这类样品的制备方法。
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