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编号:12084968
人羊膜间充质细胞分离培养及其干细胞特性研究
http://www.100md.com 2011年1月15日 李海建 张广静 江兰 余春艳 金岩
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    李海建 张广静 江兰 余春艳 金岩 第四军医大学唐都医院皮肤科;第四军医大学组织工程研发中心;

    【摘要】目的:研究人羊膜间充质细胞(Humanamnioticmesenchymalcells,HAMCs)的分离、培养及其干细胞特性,为羊膜间充质细胞在再生医学的潜在应用奠定实验基础。方法:无菌条件下取正常足月剖腹产胎儿的羊膜剪成碎片,经胰酶胶原酶序贯消化,DMEM/F12培养,倒置显微镜下观察其形态,MTT法检测其生长规律,免疫荧光的方法对细胞进行鉴定,定向诱导方法检测细胞的多向分化潜能。结果:来源于羊膜的间充质细胞,细胞免疫荧光显示SSEA-4,OCT-4阳性,具有很强的增殖能力,并且具有一定的多向分化能力,在特定条件下可分化为脂肪细胞和成骨细胞;结论:羊膜间充质细胞能够在体外分离、培养、扩增,并且具有干细胞特性。羊膜间充质细胞在再生医学和组织工程应用有很好的前景。

    【关键词】 羊膜间充质细胞 细胞培养 干细胞 组织工程

    【基金】国家“863计划”组织工程皮肤重大专项资助项目(2002AA205041,2005AA205241)

    【分类号】R329

    前言人羊膜是来源于胎儿的胚胎早期产物,羊膜细胞包括羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞,从胚胎发育的角度来看,人羊膜上皮细胞来源于受精后第8天的胚胎外胚层,羊膜间充质细胞来源于原条的胚外中胚层[1]。近年来,有越来越多的学者关注于人羊膜间充质细胞,其中In′tAnker等[2]从羊
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     前言

    人羊膜是来源于胎儿的胚胎早期产物,羊膜细胞包括羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞,从胚胎发育的角度来看,人羊膜上皮细胞来源于受精后第8天的胚胎外胚层,羊膜间充质细胞来源于原条的胚外中胚层。近年来,有越来越多的学者关注于人羊膜间充质细胞,其中In’t Anker等从羊膜培养出MSCs,经免疫表型鉴定与骨髓来源的MSCs相似,且其比骨髓来源的MSCs具有更强的扩增能力。Francesco Alviano等证明羊膜间质干细胞在体外可以诱导分化为脂肪细胞、软骨细胞、骨骼肌细胞、神经细胞、内皮细胞和心肌细胞。这些研究提示,人羊膜组织含有干细胞样细胞。从羊膜分离、培养干细胞,因其来源广泛,不受伦理限制等优越性而具有广阔的应用前景,有望成为再生医学领域的可靠细胞。然而,目前国内对羊膜间充质细胞的生物学特性研究还比较少,为此,作者进行了人羊膜间质细胞的分离、培养及鉴定,并在体外研究其千细胞特性。

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