人颈椎间盘髓核细胞的体外培养和鉴定
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杨勇 梁伟 张世磊 陶慧人 罗卓荆 第四军医大学西京医院全军骨科研究所;
【摘要】目的:建立人颈椎间盘髓核细胞体外培养体系,并对其细胞表型进行鉴定。方法:采用酶消化法分离人颈椎间盘髓核细胞,进行单层培养,倒置相差显微镜观察细胞生长和形态,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,并行甲苯胺蓝、Ⅱ型胶原及CK8免疫组化染色对其细胞表型进行鉴定。结果:原代髓核细胞凋亡率6.1±1.4%,S期细胞比例7.3±0.5%。贴壁后形态为多角形或短楔形,传代后生长加速。细胞呈甲苯胺蓝异染性;Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性;只有少量椭圆形大细胞CK8免疫组化染色阳性。结论:成功建立人颈椎间盘髓核细胞体外培养模型,并证实成年后髓核内仍有少量细胞保持脊索细胞表型。
【关键词】 椎间盘 髓核细胞 脊索细胞 细胞鉴定
【基金】国家自然科学基金资助(81000813)
【分类号】R681.55
前沿颈椎病是中老年人的常见病、多发病之一。随着年龄增长发病率越来越高。给患者及其家庭和社会带来沉重的精神和经济负担,是影响健康的重要障碍之一。颈椎间盘退变是导致颈椎病始动因素。椎间盘组织学构成包括椎间盘细胞和细胞外基质:椎间盘细胞可以合成和分泌细胞外基质
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前沿
颈椎病是中老年人的常见病、多发病之一。随着年龄增长发病率越来越高。给患者及其家庭和社会带来沉重的精神和经济负担，是影响健康的重要障碍之一。颈椎间盘退变是导致颈椎病始动因素。椎间盘组织学构成包括椎间盘细胞和细胞外基质：椎间盘细胞可以合成和分泌细胞外基质成分并调控细胞外基质成分有序合理的组织，从而使椎间盘行使正常功能的基本要求，所以椎间盘退变必有其细胞学基础。近几年椎间盘组织工程成为了国内外研究热点，有望彻底改进目前的治疗模式，这就需要大量的获取合适的种子细胞。最近的研究发现成年后髓核组织内可能仍有脊索细胞的存在。本研究旨在建立颈椎间盘髓核细胞体外培养体系，并对其细胞表型进行鉴定，为从细胞学水平研究颈椎间盘退变、颈椎间盘组织工程种子细胞的选择及明确成人髓核内脊索细胞的存在与否提供实验依据。
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