HA纳米载体介导转hGM-CSF基因的HepG2疫苗诱导的抗瘤效应研究
肝肿瘤,肿瘤疫苗,免疫治疗,粒细胞巨噬细胞集落刺激因子,外周血单个核细胞
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曾治中 段晓明 程元星 黄璐 贺修胜 南华大学研究生院;长沙市第四医院消化内科;南华大学肿瘤研究所;
【摘要】目的:观察HA纳米颗粒载体介导转染hGM-CSF基因的HepG2细胞疫苗体外抗肿瘤效应,为hGM-CSF基因修饰的HepG2细胞疫苗的临床应用提供依据。方法:HA纳米颗粒载体介导hGM-CSF基因转染HepG2细胞制备转GMCSF基因的HepG2细胞疫苗。密度梯度离心法分离人PBMC,体外诱导人PBMC。WST-1法测定PBMC的增殖活性及对HepG2细胞的杀伤效应,流式细胞术分析CD4+和CD8+的阳性表达率,ELISA法测定INF-γ的分泌。结果:WST-1结果显示,转基因HepG2组疫苗能诱导PBMC增殖,其增殖率优于野生型疫苗(p0.05);其诱导的PBMC对HepG2的杀伤率高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p0.05)。FCM结果显示,转基因HepG2疫苗组PBMC中CD4+和CD8+阳性表达率均高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p0.05)。ELISA结果显示,转基因组PBMC培养上清中IFN-γ含量为1989.76±254.21pg/ml,高于各野生型疫苗组和各空白对照组(p0.05)。结论:HA纳米颗粒载体介导转染hGM-CSF基因能增加HepG2细胞疫苗的免疫原性,转hGM-CSF基因HepG2细胞疫苗可有效诱导PBMC增殖、分化,增加INF-γ的分泌,提高其对HepG2细胞的杀伤作用。
【关键词】 肝肿瘤 肿瘤疫苗 免疫治疗 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 外周血单个核细胞
【基金】湖南省卫生厅科研基金资助项目(B2005-178)
【分类号】R735.7
原发性肝癌(primarylivercancer,PLC)是我国常见、难治性恶性肿瘤之一,其中90%为肝细胞肝癌(hepatocellularcarci-noma,HCC),占我国恶性肿瘤死亡率的第2位。手术切除为肝癌治疗的首选方法,但其疗效仍欠满意,术后5年复发率亦高现代生物医学进展www.shengwuyixue.com Progressin
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原发性肝癌(pnmary liver cancer,PLC)是我国常见、难治性恶性肿瘤之一，其中90%为肝细胞肝癌(hepatocellular carci-noma,HCC)，占我国恶性肿瘤死亡率的第2位。手术切除为肝癌治疗的首选方法，但其疗效仍欠满意，术后5年复发率亦高达60%～70%甚至更高，肿瘤复发转移仍是函待解决的堆题。
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