双亲灭活制备粘质沙雷氏菌和红曲霉的跨界产色素融合子
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周林 朱爽 潘敏芬 蔡泽加 许尧滨 广东药学院生命科学与生物制药学院;
【摘要】目的:采用双亲灭活原生质体技术制备粘质沙雷氏菌和红曲霉的跨界产色素融合子,并测定其抑菌活性。方法:经0.2%溶菌酶处理获得粘质沙雷氏菌的原生质体并热灭活;经混合酶(0.8%溶菌酶+1.2%蜗牛酶+1.6%纤维素酶)处理获得红曲霉的原生质体并紫外灭活;用含25%PEG的原生质体融合剂进行促融合与再生。观察融合子的菌落形态和色素合成能力,测定融合子色素提取物对金黄色葡萄球菌的抑制活性。结果:在优化条件下,粘质沙雷氏菌原生质体的形成率为92.58%,红曲霉原生质体形成数约为106个/mL,两菌原生质体灭活率均为100%。共获得13个融合子,9个能产红色素,融合率为1×10-5%。其中8个融合子的95%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌表现出不同程度的抑制。结论:采用双亲灭活原生质体技术,能够制备具有抑菌活性的粘质沙雷氏菌和红曲霉的跨界产色素融合子。
【关键词】 跨界原生质体融合 粘质沙雷氏菌 红曲霉 色素
【基金】广东药学院博士启动基金(2006SMK01) 广东省高等学校大学生创新实验项目(1057310036)
【分类号】R915
前言原生质体融合能将遗传形状不同的细胞经过基因重组融合为一个新的细胞,是一种重要的细胞工程技术。原生质体融合在提高菌种的产酶活力[1,2]、代谢产物的含量[3,4]、降解污染物的能力[5,6],以及对环境的耐受性[7,8]等微生物育种方面的应用已有报道。目前,原生质体融合在食
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前言
原生质体融合能将遗传形状不同的细胞经过基因重组融合为一个新的细胞，是一种重要的细胞工程技术。原生质体融合在提高菌种的产酶活力、代谢产物的含量、降解污染物的能力，以及对环境的耐受性等微生物育种方面的应用已有报道。目前，原生质体融合在食品、医药领域的应用限于种或属间融合，跨界融合的报道很少。我们认为，与属种间的融合相比，跨界融合更有可能产生结构和功能新颖的分子，因而在药物或前体分子产生方面，提供了不同于常规的“组合化学合成或高通量筛选”的新的途径。本文尝试应用原生质体融合技术，制备具有抑菌活性的跨界产色素融合子。
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