苦参碱对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子和自由基的影响
吡啶,1材料与方法,2方法,3统计学方法,2结果,1苦参碱对结肠细胞内IL-1β和TNF-α的影响,2苦参碱对结肠细胞中IL-6,IL-8的影响,3苦参碱对结肠细胞中SOD,MDA的影响,4光镜观察,3讨论
钟振东,熊永爱,杨玲溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种自身免疫性的直肠、结肠的慢性炎性和溃疡性病变,属临床疑难病。主要表现为腹泻、腹痛、黏液血便等症状[1]。目前 UC 病因与机制尚不十分明确,但已明确免疫反应异常,细胞因子分泌失衡是其发病中的重要环节[2]。IL-1β、IL-6、IL-8 和 TNF-α是公认能介导 UC 发病的细胞因子,UC 活动期IL-1β、IL-6、IL-8 和 TNF-α 的分泌量与病变程度成正相关[3]。
自由基对结肠黏膜细胞损伤也是溃疡性结肠炎发病的重要机制。当机体氧自由基产生过多,而抗氧化物质活性较低时,氧自由基在引起脂质氧化的同时,增加黏膜的通透性,使吞噬细胞活动进一步加强,产生更多的氧自由基,导致组织细胞的损伤[4]。
中药苦参能改变 UC 患者腹痛、腹泻等临床症状,是临床上治疗 UC 常用中药之一[5]。苦参碱是从苦参中提取的有效成分,现代研究证明,苦参碱能抑制炎症介质释放,抗炎作用与氢化可的松相似,但没有氢化可的松的毒副反应。苦参碱能降低毛细血管通透性,抑制肉芽组织增生。此外,还能对抗自由基氧化对细胞导致的损伤,抑制纤维生成等作用[6]。但目前关于苦参碱对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜细胞因子和自由基的影响尚无报道,本研究通过苦参碱对 TNBS 诱导大鼠溃疡性结肠炎治疗,探讨苦参碱对实验性溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜细胞因子和自由基的影响,进而研究苦参碱干预UC 机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 雄性 SD 大鼠 60 只,8~12 周龄,体重 180~220 g,购自成都达硕生物科技有限公司,合格证号 scxk(川)2008-24,饲养于 IVC 级动物房。
1.1.2 药品和试剂 苦参碱由四川省农业科学院提供。三硝基苯磺酸(TNBS)(批号:107K5008)购自美国 Sigma 公司;IL-1β(批号:E10J0402)、TNF-α(批号:E10J0403)、IL-6(批号:E10J0404)、IL-8(批号:E10J0405)试剂盒由成都杰纳生物科技有限公司提供;SOD(批号:20101015)和 MDA(批号:20101112)试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
1.2 方法
1.2.1 动物分组及 UC 模型复制 SD 大鼠适应1 周饲养后,随机分成 4 组,每组 15 只动物。禁食 24 h 后,除正常组外,其他组按 3 ml/kg 体重腹腔注射 20%乌拉坦溶液麻醉 ......
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