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编号:1229316
罗布泊来源胀果甘草根际枯草芽孢杆菌GA21次生代谢产物结构与活性初步研究
http://www.100md.com 2012年8月9日 中国医药生物技术 2012年第1期
香豆素,念珠菌,1材料与方法,2方法,2结果,1化合物GA21-20和GA21-26的结构鉴定,2GA21菌株发酵液粗品抗细菌及抗真菌活性,3化合物GA21-20和GA21-26的抗真菌
     靳婧,旭格拉·哈布丁,刘少伟,郭琳,蒋忠科,栾迎春,李展先,潘臻,孙承航

    特殊生态环境,尤其是极端环境是发现新微生物资源及新活性分子的宝库,近年来对这一宝库的资源勘探和新活性分子的发掘,在国际上已成为新的研究热点[1-3],针对这一研究热点,我们对来源于有地球“旱极”之称的罗布泊[4]及周边地区的微生物药用资源开展了勘探和药物筛选的研究工作,其中在以水稻稻瘟菌为检定菌,对沙生植物胀果甘草根际土壤分离出的一批放线菌和芽孢杆菌进行活性筛选过程中发现,枯草芽孢杆菌 GA21 的发酵液具有较强抗真菌活性。本文报道了枯草芽孢杆菌GA21 的培养,GA21-20 和GA21-26 的分离纯化,GA21-20 的谱学数据以及新化合物 GA21-26的抗真菌活性。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株 菌株 GA21 经 16S rRNA 测序及NCBI 数据库 BLAST 比对表明 GA21 与菌株Bacillus Subtilis strain 47-B-41 核糖体碱基序列相似性为 100%,鉴定为枯草芽孢杆菌。

    1.1.2 植物病原真菌 水稻稻瘟菌(Pyricularia oryzae)由浙江省农业科学院夏湛恩研究员馈赠。

    1.1.3 培养基 GA21 的斜面、种子和发酵培养基均为改良高氏一号培养基(可溶性淀粉 20 g,氯化钠 50 g,磷酸氢二钾 0.5 g,硝酸钾 1 g,硫酸镁 1 g,硫酸亚铁 0.02 g,葡萄糖 1 g,蛋白胨 0.5 g,胰蛋白胨 0.3 g,蒸馏水 1000 ml,10% 无水碳酸钠调 pH 8.0)。

    水稻稻瘟菌培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA 培养基)由广东环凯生物科技有限公司提供。

    白色念珠菌培养基 沙堡培养基(SDA 培养基)(麦芽糖 40 g,蛋白胨 20 g,琼脂 20 g,蒸馏水 1000 ml,调 pH 6.0)。

    大肠杆菌培养基、金黄色葡萄球菌培养基均为LB 培养基(酵母提取物 5 g,蛋白胨 10 g,NaCl 5 g,蒸馏水 1000 ml,调 pH 7.5)。

    1.1.4 试剂 分析纯乙酸乙酯、甲醇等均为北京化工厂生产;色谱级甲醇购于美国 Honeywell Burdick & Jackson 公司;水为屈臣氏蒸馏水。

    1.1.5 分离填料 TLC 板、Silica gel 60 F254 铝箔板及玻璃板为德国 Merck 公司产品;高效液相色谱半制备柱 Zorbax SB-C18(9.4 mm × 250 mm ......

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