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编号:1229306
链霉菌I06A-00625发酵产物的提取分离、结构鉴定及活性研究
http://www.100md.com 2012年12月1日 中国医药生物技术 2012年第2期
烯类,念珠菌,单胞菌,1材料与方法,2方法,2结果,1分离纯化结果,2活性化合物结构鉴定,3活性测定,3讨论
     贾贝,何宁,赵莉莉,余利岩,蒋忠科,姜蓉

    铜绿色假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)是假单胞菌属中的代表菌种,是一种重要的院内感染条件致病菌,常常感染免疫力低下的病人,引起菌血症、肺炎、泌尿系统感染。由于铜绿色假单胞菌外膜通透性低并存在着外排多种物质的主动外排系统(active efflux systems),使得其具有先天的多重耐药性[1],临床治疗十分困难,一旦感染,死亡率很高,已经成为临床医生面临的治疗难题之一。因此,迫切需要发现新的抗铜绿色假单胞菌的药物。

    前期的研究结果发现链霉菌 I06A-00625(cpcc201504)的发酵液样品具有抑制铜绿色假单胞菌生长的活性。本研究通过对 I06A-00625 发酵液抗真菌组分的分离纯化,得到 6个单一化合物,对其进行结构解析并进行抗菌活性研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株 链霉菌 I06A-00625、铜绿色假单胞菌(ATCC 29212)、黑曲霉菌(BM,ATCC 16404)和白色念珠菌(CA,ATCC 10231)均由本所菌种中心提供。

    1.1.2 种子培养基与发酵培养基 含葡萄糖 5 g,酵母膏 5 g,蛋白胨 5 g,牛肉膏 5 g,玉米浆 4 g,黄豆饼粉 10 g,碳酸钙 4 g,氯化钴 0.02 g,淀粉20 g,水 1 L,pH 7.2。

    1.1.3 实验试剂及仪器 大孔吸附树脂 X-5和葡聚糖凝胶 LH-20 为上海生化试剂厂产品;Agilent 1200A 型高效液相色谱仪和半制备色谱柱(9.4 mm×250 mm,5 μm)均为美国安捷伦公司产品;UV 2550 型紫外光谱仪为日本 Shimadzu公司产品;Varian VNS-600 型 600M 核磁共振仪为瑞士瓦里安公司产品;LTQ-Orbitrap 质谱仪为美国赛默飞世尔公司产品;高效液相用色谱纯乙腈为美国 SK Chemicals公司产品;其他试剂均为国产分析纯。

    1.2 方法

    1.2.1 菌种发酵 菌种I06A-00625 于琼脂斜面培养基上 27 ℃ 培养 7 d ......

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