丰肉结海绵相关链霉菌LS298活性代谢产物研究
脯氨酸,化合物,1材料与方法,2方法,2结果,1结构鉴定,2体外抗肿瘤活性筛选,3抗菌活性筛选,3讨论
崔美子,巩婷,朱平随着从陆生放线菌中分离得到的新的候选药物数量的锐减[1],人们把目光投向了更为广阔的环境——海洋。与陆生微生物相比,海洋微生物能够耐受海洋特有的高盐、高压、低氧、低温、低光照等多种极端的条件,因此形成了独特的代谢和生理特性,产生了一系列化学结构独特、生理功能显著的次生代谢产物[2]。海洋放线菌作为海洋微生物的一个重要组成部分,其代谢产物也正日益受到关注,成为寻找和发现新的天然产物包括候选药物的重要来源[3]。
我们对从我国南海水域采集的丰肉结海绵(Gelliodes carnosa)中分离得到的一株放线菌LS298 进行了研究。通过 16S rRNA 分子生物学方法初步判定菌株 LS298(GenBank 编号 FJ937945)为链霉菌属的放线菌。活性筛选发现该菌株的发酵产物显示了较强的抗菌和体外抗肿瘤活性。通过对该菌株的发酵粗提物进行提取分离,目前已得到12 个化合物,其中一个被初步认定为该菌株的主要抗菌和抗肿瘤活性成分之一。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌株 链霉菌菌株 LS298 和生物检定菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)63501 均为本实验室保存。
1.1.2 培养基 种子培养基(改良高氏 1 号培养基):可溶性淀粉 20 g/L、KNO31 g/L、NaCl 0.5 g/L、K2HPO40.5 g/L、MgSO40.01 g/L、天然海水,pH 7.2,121 ℃ 高压蒸汽灭菌 20 min,冷却后备用。
发酵培养基(改良 A1 培养基):可溶性淀粉10 g/L、胰蛋白胨 2 g/L、酵母提取物 4 g/L、天然海水,pH 7.2,121 ℃ 高压蒸汽灭菌 20 min,冷却后备用。
生物检定培养基:胰蛋白胨 5 g/L、牛肉膏 3 g/L、酵母提取物 1.5 g/L,pH 7.2。上层加 0.8% 琼脂粉,下层加 1.5% 琼脂粉。121 ℃ 高压蒸汽灭菌 20 min,冷却后备用。
1.1.3 仪器 核磁共振谱采用美国 Varian 公司的 Mercury-300、Mercury-400、UNITY VNS-600型、瑞士 Bruker 公司的 AVANCE-500 型核磁共振波谱仪测定,四甲基硅烷(TMS)作为内标;ESI-MS 采用美国 Agilent 公司 1100 LC/MSD Trap SL 型液相质谱联用仪测定,EI-MS 采用英国Micromass 公司 VGZAB-2F 型质谱仪测定;样品分析和分离采用美国 Agilent 1200 分析型高效液相色谱仪和日本岛津 LC-20A 型半制备高效液相色谱仪;HZQ-Q 恒温振荡摇床由哈尔滨东联科学仪器有限公司生产 ......
您现在查看是摘要页,全文长 21129 字符。