李研，陈省平，赖小敏，王聪，王娟，袁广卿，彭毅

    生物安全三级实验室是按照我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》[1]和《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2008)[2]等有关病原微生物实验室生物安全法规和标准，以及 WHO《实验室生物安全手册》(第三版)[3]中的三级生物安全(biosafty level 3，BSL-3)防护标准建立的病原微生物实验室，是专门针对通过气溶胶或其他途径传播，可导致严重后果或生命危险的内源性和外源性病原而特设的适用于临床、诊断、教学、科研的设施。高级别生物安全实验室中所研究的病原体大多数具有气溶胶感染的特性[4]。随着经济的高速发展和近年来传染性非典型肺炎(又称严重急性呼吸综合症，severe acute respiratory syndromes，SARS)和高致病性禽流感等疾病的暴发流行，实验室生物安全问题受到了社会各界的广泛关注[5]。如何避免实验室生物安全问题的产生已成为科研人员高度关注的问题。实验室的消毒、灭菌是关键之一。目前，生物安全实验室多采用物理及化学的方式来杀灭实验室内微生物或其他有害病原体。物理的消毒方法主要有紫外线照射、干热灭菌、压力蒸汽灭菌、高效空气过滤器(high efficiency particulate air filter，HEPA 过滤器)过滤等。其中紫外线消毒是大多数普通生物实验室采用的消毒方法，但紫外线消毒受很多因素影响，如管理意识、辐射强度、灯管的使用与保养等[6]。化学消毒是使用消毒剂来杀灭病原微生物。在化学消毒剂中，甲醛熏蒸因为具有广谱杀菌、使用方便和价格低廉等优点，已成为国内最为普遍的消毒、灭菌方法[7]。尤其在从事结核分枝杆菌研究的生物安全实验室中有气溶胶传播的特性，采用甲醛熏蒸能针对悬浮在空气中的小颗粒气溶胶进行消毒、灭菌。甲醛消毒原理是使病原体蛋白质凝固、还原氨基酸、使蛋白质分子烷基化等[8]。我们按照上述国内外法规、指南和标准，以及本实验室《生物安全三级实验室消毒灭菌手册》对实验室进行消毒，用平板培养法和聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)检测法进行消毒效果检测和验证。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 培养基 自制普通营养琼脂培养基 ......