王丽，姜华军，杨帆，杜郁，贾晓健，司书毅，洪斌

    丹酚酸B在巨噬细胞胆固醇外排中的作用

    王丽，姜华军，杨帆，杜郁，贾晓健，司书毅，洪斌

    100050 北京，中国医学科学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室(王丽、姜华军、杨帆、杜郁、贾晓健、洪斌)，国家新药(微生物)筛选实验室(司书毅)

    考察丹酚酸 B(SAB)对巨噬细胞胆固醇外排的影响。

    分别采用巨噬细胞 RAW 264.7 和 PMA 诱导的 THP-1 细胞，利用流式细胞仪检测丹酚酸 B 对已摄取DiI-acLDL 的细胞外排脂质作用的影响，对 RAW 264.7 细胞表面 ABCA1 蛋白表达水平的影响。采用 ABCA1 的抑制剂 DIDS 及小分子干扰 RNA 的方法检测ABCA1 在丹酚酸 B 诱导的促进脂质外排过程中的作用。进而利用靶向 CD36 的小分子干扰 RNA，通过抑制 CD36 的表达，检测 CD36 在丹酚酸 B 促进载脂巨噬细胞脂质外排过程中的作用。

    采用 DiI 荧光标记的脂质检测巨噬细胞对脂质的外排作用，结果显示 SAB 显著增加了荷脂细胞对 DiI-acLDL 的外排作用。对脂代谢相关转运蛋白表达的检测结果显示，在荷脂的 RAW 264.7 细胞中，SAB 能够以一定剂量依赖的方式增加细胞表面 ABCA1 蛋白水平的表达。进一步研究显示，上述 SAB 促进外排的作用可被 ABCA1 的抑制剂或者 siRNA 的作用消除，确证了 ABCA1 在 SAB 介导的脂质外排过程中的重要作用。同样利用 CD36 小分子干扰 RNA 将 CD36 表达抑制后，SAB 促进外排的作用消失，说明 SAB 介导的细胞脂质的外排作用同样依赖于 CD36。

    丹酚酸 B 通过上调 ABCA1 的表达，促进巨噬细胞胆固醇或脂质的外排，且该作用依赖于 ABCA1 及 CD36，为 SAB 抗动脉粥样硬化作用新机制的研究提供了重要依据。

    动脉粥样硬化； 丹酚酸 B； ATP 结合盒转运蛋白 A1； 抗原， CD36； 胆固醇逆转运

    心脑血管疾病是当今世界发病率最高的疾病之一，其致死、致残率高居各类疾病之首。动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是心脑血管疾病的主要病理基础，而脂质代谢紊乱尤其是胆固醇代谢紊乱是其公认的主要致病因子。大量的流行病学和临床研究表明，血浆中低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)水平与动脉粥样硬化危险性呈正相关[1-2]，而高密度脂蛋白(high density lipoproteins ......