邢咏梅，李向东，郭顺星

    软腐病病原菌对金钗石斛致病性的形态学研究

    邢咏梅，李向东，郭顺星

    100193 北京，中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所(邢咏梅、郭顺星)；100195 北京，中国药材公司(李向东)

    旨在研究软腐病病原菌终极腐霉对金钗石斛致病的形态学特征。

    利用终极腐霉孢子悬液喷洒法对金钗石斛组培苗叶片进行致病性实验，对健康的以及感染终极腐霉 48 h 后的金钗石斛的叶片应用水压片法在光学显微镜下观察两者的形态差别。对健康的金钗石斛及感染终极腐霉 48 h 后的植株的根、茎、叶进行扫描电镜观察并分别比较致病前后微观结构的差异。

    压片法观察叶片部位结果显示，健康的金钗石斛叶片结构完整；致病组可见终极腐霉病原菌在金钗石斛叶片中生长旺盛，大量卵孢子和孢子囊分布于叶肉细胞间。感染病原菌后的叶肉细胞完整性受到严重破坏。扫描显微镜观察结果显示：叶肉细胞、叶鞘组织、幼嫩根尖细胞以及根被为发病的关键部位。在茎部菌丝通过消解细胞壁进入细胞。在根部菌丝除通过消解细胞壁进入细胞外，还通过根被表面的许多孔洞进入细胞。病原菌菌丝体通过叶背面大量分布的气孔结构或叶表面极具破坏性地进入叶片体内，并形成典型的附着胞结构。

    终极腐霉主要通过机械穿透和分泌降解酶破坏寄主细胞的细胞壁及其内部结构。

    石斛； 植物组成部分； 终极腐霉； 软腐病

    石斛属(spp.)是兰科植物的第二大属，目前该属在全世界共发现 1100 多种，在我国有 76 个种和 2 个变种。其中，石斛属药用植物金钗石斛(Lindl)是传统名贵中药，被我国历版药典所收录[1-2]，以其干燥或新鲜的茎入药，具有滋阴清热、益胃生津之功效[3]。由于近年来石斛属药用植物被过度挖掘，野生资源濒临枯竭，石斛属药用植物已被国家列为一级保护植物名录。

    随着人们对石斛中药材需求量的逐渐增加，目前药用石斛属植物人工栽培的面积不断扩大[4]。然而，随之而来的各种病害不断出现，严重阻碍了人工栽培的进一步发展，并给种植户带来了巨大的经济损失。有研究表明，钟器腐霉曾在云南省导致大规模鼓槌石斛、球花石斛、线叶石斛茎部的腐烂[5]。在以往的研究中，我们鉴定出金钗石斛软腐病的病原真菌为终极腐霉[6]。

    为深入研究软腐病病原菌终极腐霉的致病机理，探讨其在导致金钗石斛软腐病病害过程中的机制，金钗石斛的根、茎和叶等部位发生的显微、超微结构变化以及病原菌在植物体内的分布和侵染情况，本研究采用水压片法以及扫描电镜观察法分别对接种终极腐霉病原菌前后金钗石斛苗的根、茎和叶的结构变化进行观察 ......