李百勇，王忠民，王谦，詹建军，黄昭亮，庞醒华，刘志兵，叶才果，李钊明，刁思娴，张鹏，夏瑜

    阻断白介素12 p40功能的新型治疗性单克隆抗体的开发

    李百勇，王忠民，王谦，詹建军，黄昭亮，庞醒华，刘志兵，叶才果，李钊明，刁思娴，张鹏，夏瑜

    528437 广东省中山市，中山康方生物医药有限公司

    设计并利用抗体工程方法构建并制备全新序列的阻断白介素 12(IL-12)p40 功能的单克隆抗体 MAB1，并对其生物学活性进行鉴定，以制备可应用于治疗多种自身免疫病的 IL-12 通路的阻断剂。

    根据已有的 IL-12 p40 蛋白序列，设计、构建并制备了全新的单克隆抗体 MAB1，利用间接 ELISA 测定其与抗原结合的亲和力，并用细胞学方法鉴定它的生物学活性。

    抗体 MAB1 与 p40 抗原的结合亲和力为0.0399 nmol/L，并能明显抑制 IL-12 诱导的人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)水平上调。其抗原结合能力以及抑制 IL-12 生物学活性能力与美国强生公司抗体药 Stelara(ustekinumab)相当或更优。

    全新构建的单克隆抗体 MAB1 可作为 IL-12 通路的高亲和力阻断剂，从而成为自身免疫疾病(例如斑块型银屑病)治疗用新药的临床候选药物。

    细胞因子类； 白细胞介素 12 亚单位p40； 抗体，单克隆； 自身免疫疾病

    白介素 12(interleukin-12，IL-12)，又名细胞毒淋巴细胞成熟因子(cytotoxic lymphocyte maturation factor，CLMF)，或者 NK 细胞刺激因子(natural killer cell stimulation factor，NKSF)，是白介素家族中的一员。IL-12 具有独特的异源二聚体结构，是由 p40 和 p35 两个亚基通过二硫键共价连接形成。IL-12 参与机体的抗肿瘤[1-3]、抗过敏、抗感染[4]过程，但其过量又造成机体免疫调节失衡导致自身免疫病。由IL-12 诱导并促进细胞介导的自身免疫已在非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠动物模型[5]、实验性结肠炎[6]、胶原性关节炎(CIA)以及实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)[7]和实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)[8]动物模型中得到证实。还有许多研究报道 IL-12 参与狼疮性肾炎的发病机制[9]。本文应用以晶体结构为基础的单克隆抗体技术构建特异性阻断 IL-12 p40 抗体，作为 IL-12 通路的阻断剂，为自身免疫疾病(例如斑块型银屑病)治疗用新药的临床研究提供候选药物 ......