徐峰，刘舒云，彭江，卢世璧，孙逊，尹合勇，孙振，余晓明，肖波，张金鑫，袁玫，许文静，郭全义

    ·论著·

    血管周围干细胞在大鼠脂肪组织中的含量及其体外扩增后比例的变化

    徐峰，刘舒云，彭江，卢世璧，孙逊，尹合勇，孙振，余晓明，肖波，张金鑫，袁玫，许文静，郭全义

    目的 探索大鼠脂肪组织中血管周围干细胞(PSCs)在脂肪组织细胞中所占的比例，以及体外培养扩增后的大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)中 PSCs比例的变化，为组织工程自体细胞移植修复骨和软骨损伤的实验研究提供可能的新型种子细胞。

    方法 取大鼠的脂肪组织用 II型胶原酶消化得到血管基质成分(SVF)并且体外培养扩增大鼠ADSCs至 P3代，用细胞计数仪及流式细胞仪检测 SVF细胞密度、活细胞比例、PSCs含量，检测 ADSCs中PSCs的含量并与CD45–SVF细胞中 PSCs含量进行比较。

    结果 经细胞计数仪分析，每只大鼠约 3 ml脂肪组织消化所得 SVF中活细胞比例为(69.31±6.57)%，可收获活细胞(40.69±6.81)×106个。经流式细胞仪检测，每只 SD大鼠 3 ml脂肪组织中平均可以得到 PSCs活细胞为(1.60± 0.59)×106个，血管外周细胞为(0.18±0.04)×106个，血管外膜细胞为(1.42±0.57)×106个。而体外平面培养扩增的 P3代ADSCs中，PSCs及各细胞亚群的比例并没有随着细胞的扩增而改变(P>0.05)。

    结论 大鼠脂肪组织中含有 PSCs，可以直接通过流式分选获取大量 PSCs，不进行体外扩增即可望满足骨和软骨组织工程种子细胞的需要。

    血管周围干细胞； 脂肪间充质干细胞； 流式细胞术

    目前，血管周围干细胞(perivascular stem cells，PSCs)成为种子细胞新的研究热点[1]，其在骨组织工程研究中对骨缺损的良好修复能力已经得到了证实[2-3]，血管外周细胞(pericytes)体外研究证实亦有较强成软骨能力[4]，可以大量分泌血管内皮生长因子(VEGF)、血小板源性生长因子(PDGF-BB)等生长因子[5]，是一种崭新的、具有潜力的组织工程种子细胞。血管周围干细胞位于大、中、小以及毛细血管周围，被认为是一种未分化的纯净的间充质干细胞[3]。PSCs包括两个干细胞亚群[2-3]，分别为位于毛细血管等最小血管周围的血管外周细胞和存在于较大血管周围的血管外膜细胞(adventitial cells)。血管外周细胞的细胞表面标记为 CD146+、CD45–、CD34–；血管外膜细胞的表面标记为 CD146–、CD45–、CD34+ ......