重组人胸腺肽α1研究进展
基因工程,生物,1胸腺肽α1的制备技术,2重组人胸腺肽α1制备技术,3重组人胸腺肽α1注册现状,4展望
王孟军重组人胸腺肽α1研究进展
王孟军
胸腺肽 α1(thymosin α1)是一种具有免疫调节作用的小分子活性多肽,已广泛应用于临床,主要用于原发性和继发性免疫缺陷症,如慢性乙型肝炎、重症乙型肝炎、抗病毒、治疗 AIDS等,并用作各种恶性肿瘤前期化疗、放疗的辅助用药[1-3]。
胸腺肽 α1的生产技术经历了生物提取、固相合成等技术发展过程,目前主要采用固相合成法生产,虽然与生物提取法相比在质量、成本等方面有较大优势,但仍然没有解决工业化大规模生产等问题。通过查询各种公开资料及汇总分析各种方法、技术状况,发现采用基因工程重组技术生产重组人胸腺肽 α1成为当前研发的热点,且首个重组人胸腺肽α1药品即将获批上市,显示该技术具有较好的竞争优势和发展潜力,将成为今后胸腺肽 α1技术发展的主要方向。
1 胸腺肽 α1的制备技术
Goldstein等[4]在 20世纪 70年代末期从胸腺生成素第 5组分(TF5)中分离纯化出一种小分子生物活性多肽,具有胸腺肽类似的生物活性,命名为胸腺肽 α1。它由 28个氨基酸组成,等电点为 4.2,相对分子量 3108,结构式为:Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH。
目前生产胸腺肽 α1的技术有生物提取法和固相合成法,生物提取法是以新鲜小牛胸腺组织为原料,采用冻融和离子色谱法提纯获得胸腺肽 α1,固相合成法主要采用Wang树脂等为起点,逐个添加氨基酸延伸肽链长度合成胸腺肽 α1。
生物提取法以动物组织为原料,受原料来源及新鲜程度等影响,收率和质量不易控制。曹强庚等[5]认为不同年龄的牛胸腺组织中胸腺肽含量存在很大差别,刚出生的乳牛胸腺肽含量最高,而材料的新鲜程度也对胸腺肽的质量和收率有较大影响。尽管生物提取法通过改进工艺而不断提高收率,但是胸腺肽在胸腺组织中的含量很低(<1%)[6],其有效成分胸腺肽 α1在市售胸腺肽粗粉中的含量也仅为 0.6%~1%。因此,原料来源少和收率低是生物提取法制备胸腺肽α1的最大限制因素。
固相合成法可生产纯度很高的胸腺肽 α1,如刘标和汤斌[7]采用反相离子对液相色谱法,通过多步分离纯化获得纯度达 99.5%的胸腺肽 α1产品。但由于合成步骤多,周期长,条件苛刻,获得高纯度的产品需要多步纯化,造成总收率偏低 ......
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