王孟军

    重组人胸腺肽α1研究进展

    王孟军

    胸腺肽 α1(thymosin α1)是一种具有免疫调节作用的小分子活性多肽，已广泛应用于临床，主要用于原发性和继发性免疫缺陷症，如慢性乙型肝炎、重症乙型肝炎、抗病毒、治疗 AIDS等，并用作各种恶性肿瘤前期化疗、放疗的辅助用药[1-3]。

    胸腺肽 α1的生产技术经历了生物提取、固相合成等技术发展过程，目前主要采用固相合成法生产，虽然与生物提取法相比在质量、成本等方面有较大优势，但仍然没有解决工业化大规模生产等问题。通过查询各种公开资料及汇总分析各种方法、技术状况，发现采用基因工程重组技术生产重组人胸腺肽 α1成为当前研发的热点，且首个重组人胸腺肽α1药品即将获批上市，显示该技术具有较好的竞争优势和发展潜力，将成为今后胸腺肽 α1技术发展的主要方向。

    1 胸腺肽 α1的制备技术

    Goldstein等[4]在 20世纪 70年代末期从胸腺生成素第 5组分(TF5)中分离纯化出一种小分子生物活性多肽，具有胸腺肽类似的生物活性，命名为胸腺肽 α1。它由 28个氨基酸组成，等电点为 4.2，相对分子量 3108，结构式为：Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH。

    目前生产胸腺肽 α1的技术有生物提取法和固相合成法，生物提取法是以新鲜小牛胸腺组织为原料，采用冻融和离子色谱法提纯获得胸腺肽 α1，固相合成法主要采用Wang树脂等为起点，逐个添加氨基酸延伸肽链长度合成胸腺肽 α1。

    生物提取法以动物组织为原料，受原料来源及新鲜程度等影响，收率和质量不易控制。曹强庚等[5]认为不同年龄的牛胸腺组织中胸腺肽含量存在很大差别，刚出生的乳牛胸腺肽含量最高，而材料的新鲜程度也对胸腺肽的质量和收率有较大影响。尽管生物提取法通过改进工艺而不断提高收率，但是胸腺肽在胸腺组织中的含量很低(<1%)[6]，其有效成分胸腺肽 α1在市售胸腺肽粗粉中的含量也仅为 0.6%～1%。因此，原料来源少和收率低是生物提取法制备胸腺肽α1的最大限制因素。

    固相合成法可生产纯度很高的胸腺肽 α1，如刘标和汤斌[7]采用反相离子对液相色谱法，通过多步分离纯化获得纯度达 99.5%的胸腺肽 α1产品。但由于合成步骤多，周期长，条件苛刻，获得高纯度的产品需要多步纯化，造成总收率偏低 ......