张园园，张平平，王春娥，赵爱华，杨瑞馥，魏东

    ·论著·

    布鲁氏菌抗原检测试剂用国家参考品的研制

    张园园*，张平平*，王春娥，赵爱华，杨瑞馥，魏东

    102629 北京，中国食品药品检定研究院卫生部生物技术检定方法及其标准化重点实验室(张园园、王春娥、赵爱华、魏东)；100071 北京，军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室(张平平、杨瑞馥)

    研制布鲁氏菌抗原检测试剂评价用国家参考品。

    将 3 株布鲁氏菌标准株和 10 株阴性参考菌株在各自适宜的培养基和温度下进行培养，收集新鲜培养物并灭活，采用比浊法制备阳性和阴性参考品菌液；分光光度法制备最低检出量和重复性参考品菌液。对参考品进行均匀性检测和稳定性试验，组织 4 个实验室对布鲁氏菌抗原检测试剂用参考品进行协作标定。

    建立了由 3 株布鲁氏菌为阳性参考品、10 株阴性菌为阴性参考品、最低检出量参考品及重复性参考品组成的布鲁氏菌抗原检测试剂评价用国家参考品。该参考品具有较好的均匀性及稳定性。协作标定结果为阳性参考品符合率均为 100%，阴性参考品符合率均为 90%，最低检出量参考品的检出限为 1 × 107~ 1 × 106个/ml 之间，重复性参考品均符合规定。

    研制的布鲁氏菌抗原检测试剂评价用国家参考品可用于布鲁氏菌抗原检测试剂的质量控制。

    布鲁氏菌；抗原； 国家参考品； 均匀性； 稳定性

    布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌(简称布氏菌)引起的一类人畜共患疾病，是《中华人民共和国传染病防治法》中规定报告的乙类传染病。布病在世界范围内广泛流行，是全球特别是发展中国家面临的主要公共卫生问题[1-2]。布病可通过口腔黏膜、鼻腔、眼结膜、生殖道，甚至未损伤的皮肤感染[3]。布病不仅影响畜牧业和相关产业的发展，造成社会经济损失，还对人类的健康构成重大威胁[4]，美国疾病预防控制中心将布氏菌列为潜在的生物恐怖战剂[5-6]。我国是布病的历史疫区，近年来布病流行较为严重，且发病率逐年递增，2018 年发病率为 2.73/10 万，已经连续十年年发病人数超过 3 万。

    布鲁氏菌抗原检测是疾病诊断中重要的实验室检查项目，而我国尚无布鲁氏菌抗原检测试剂评价用国家参考品。为此，我们研制了布鲁氏菌抗原检测试剂评价用参考品，其对于布鲁氏菌抗原检测试剂的注册管理、指导我国该类试剂的健康有序发展，均具有重要意义。现将布鲁氏菌抗原检测试剂评价用参考品研制情况报道如下。

    1 材料与方法 ......