右归胶囊改善糖尿病大鼠勃起功能障碍机制的实验研究
海绵体,阴茎,1材料,2方法,3结果,4讨论
刘晓强 吕 峥 孙 光 郭宗华 郭战军 周晓亮(天津医科大学第二医院泌尿外科A区,天津市河西区平江道23号,300211)
右归丸是明代名医张景岳所创,功效温补肾阳,填精止遗,中医辨证属肾阳虚精血亏虚者。用现代工艺将其制成胶囊,克服了原蜜丸的诸多缺点。右归胶囊在治疗糖尿病性勃起功能障碍中的作用机制尚不明确,本研究应用糖尿病大鼠勃起功能障碍模型,观察不同剂量右归胶囊对DED大鼠勃起功能的影响及大鼠阴茎海绵体细胞凋亡及抗氧化指标变化,探讨右归胶囊在治疗DED中的作用机制。
1 材料
试药:右归胶囊,由江西银涛药业有限公司提供,规格:0.45g/粒。动物:选用10周龄SPF级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠70只,体重(247±26)g,由中国医学科学研究院放射医学研究所提供(交配实验证实勃起功能正常);链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,Sigma);阿扑吗啡(apomorphin,APO,Sigma);超氧化物歧化酶试剂盒、GSH试剂盒、GSH-Px试剂盒均购自南京建成生物工程研究所;单克隆兔抗大鼠Bcl-2抗体、单克隆兔抗大鼠Bax抗体、山羊抗兔二抗显色试剂盒、DAB显色试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司;罗氏血糖仪及试纸等。STZ溶液配制:STZ溶解于0.1mmol/L柠檬酸 -柠檬酸钠缓冲液(pH=4.5)中,浓度为20mg/mL,注意避光,现用现配。APO溶液:APO溶解于0.5mg/kg的维生素C与生理盐水中,调整体积为5mL/kg。
2 方法
2.1 大鼠糖尿病模型的建立与阿朴吗啡检测勃起功能 70只大鼠适应性饲养2天,随机选取60只为模型组,称重后尾静脉注射STZ溶液60mg/kg;余10只作为正常对照组,尾静脉注射相应剂量0.1mmol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。造模后96h断尾采血测定随机血糖,血糖>16.7mmol/L,出现多饮、多尿、多食等糖尿病症状判定为造模成功。将造模成功的58只DM大鼠随机分为4组,右归胶囊高剂量组3.6g·kg-1(n=15)、中剂量组 2.4g·kg-1(n=14)、低剂量组 1.2g·kg-1(n=14)、生理盐水对照组(n=15),以上各组均每日灌服给药1次,持续10周。造模成功12周后,称重后将大鼠置于透明观察箱使大鼠适应环境10min,保持室内安静、光线昏暗。大鼠颈项皮下注射阿扑吗啡100μg/kg,观察30min ......
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