维脑康干预大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的蛋白质组学研究
神经元,1材料与方法,2结果
苗 兰曹 进徐 立孙明谦刘建勋(1中国中医科学院西苑医院基础医学研究所,中药药理北京市重点实验室,北京,100091;2中国食品药品检定研究院,北京,100050)
维脑康干预大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的蛋白质组学研究
苗 兰1曹 进2徐 立1孙明谦1刘建勋1
(1中国中医科学院西苑医院基础医学研究所,中药药理北京市重点实验室,北京,100091;2中国食品药品检定研究院,北京,100050)
目的:应用LC-MS/MS蛋白质组学方法研究维脑康胶囊治疗大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法:大鼠分为正常对照组、模型对照组及维脑康胶囊组,取大鼠全血离心获得血清,进行酶解,应用nano Chip-ESIIon Trap进行样本分析,测定结果利用Agilent Spectralmill、scaffold及SIMCA P+等软件进行蛋白鉴定、模式判别及蛋白相对定量分析。结果:最终比对出正常对照组、模型对照组和维脑康胶囊组的总蛋白数分别为833个、701个和798个,与正常对照组相比,模型对照组分析出的差异蛋白共18个,其中上调的是13个蛋白,下调的是5个蛋白,而在维脑康胶囊组中这些差异蛋白的表达均有所恢复,其功能分别与神经元凋亡、神经元生长与分化、信号通路及转录调控等过程密切相关。结论:维脑康胶囊治疗局灶性脑缺血再灌注的作用机制可能与这些差异蛋白有关,为维脑康胶囊作用的分子机制研究提供了新思路。
维脑康;蛋白质组学;局灶性脑缺血再灌注
脑血管病是导致人类死亡的三大疾病之一,在全球范围内,每年使460万人死亡,中国也是脑卒中高发地区,据估计居民现患脑血管病600万,每年新发生脑血管病130万人,死亡近100万人,因此,如何有效治疗脑血管病已成为目前关注的热点。中药制剂在治疗脑血管病方面具有独特的优势,维脑康胶囊(WNK)系由人参、银杏叶等中药组成的中药复方,临床研究表明,该药对血管性痴呆(VaD)患者有明显的改善作用[1]。前期的实验研究表明WNK对化学损伤造成的小鼠获得性、巩固性及再现性记忆障碍均有改善作用[2],可能通过下调过量的氨基酸释放而起到脑保护作用[3]。但是,WNK的作用机制、具体的作用靶点尚不清楚。从蛋白质组学角度对中药的多环节、多靶点调控作用进行研究,可从整体水平揭示中药单方、复方的作用机制,阐明药物作用的物质基础。
本研究中,我们通过对正常、局灶性脑缺血再灌注模型大鼠及给予WNK治疗大鼠进行血清蛋白质提取、分离、鉴定及数据比对,从整体上研究经WNK治疗的局灶性脑缺血再灌注模型大鼠特有蛋白质的表达情况 ......
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