张 晨 黄 进 詹 菲 张 进

    (1 广州中医药大学基础医学院，广州，510006； 2 广州中医药大学门诊部，广州，510405)

    黄芪多糖对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的保护作用

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    (1 广州中医药大学基础医学院，广州，510006； 2 广州中医药大学门诊部，广州，510405)

    目的：观察黄芪多糖(APS)对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化的治疗作用。方法：采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型，造模成功后，取大鼠血清和肝组织进行检测。测定血清肝纤维化四项、肝脏组织中羟脯氨酸(HYP)含量；HE染色比较炎症及肝纤维化程度；免疫组织化学法分析肝组织中I型胶原(Col-I)、平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)表达量。结果：与模型组相比，APS中、高剂量组的肝纤四项水平、炎症及肝纤维化程度明显降低(P1 材料与方法

    1.1 实验动物 SPF级SD大鼠50只，雄性，体重180～220 g，购自广州中医药大学实验动物中心，动物合格证号：SCXK(粤)2013-0020。

    1.2 主要试剂和仪器 黄芪多糖(南京泽朗医药科技有限公司)；四氯化碳(天津富宇精细化工有限公司)；羟脯氨酸检测试剂盒(南京建成生物工程研究所，批号：20140605)；山羊血清封闭液(武汉博士德，批号：AR0009)；Col-I、α-SMA一抗(Abcam公司，批号：ab34710、ab5694)；二抗(基因科技公司，批号：GK600505)；智能生物组织脱水机(益迪YD-129)；石蜡包埋冷冻机(益迪YD-6L)；石蜡切片机(益迪YD-AB)；光学显微镜(OLYMPUS CX31)。

    2 方法

    2.1 模型制备和给药 SD大鼠50只按体重随机分成正常组、模型组、APS组(低、中、高)5组，每组10只。参照文献[8]，除正常组皮下注射花生油溶液外，其他各组大鼠由皮下注射60% CC14花生油溶液，首次注射5 mL/kg，以后以3 mL/kg每隔3 d注射1次，连续注射8周建立大鼠肝纤维化模型。APS组每天给予APS灌胃1次，低、中、高组剂量分别为0.2 g/kg、0.4 g/kg、0.8 g/kg，正常组和模型组给予等体积的生理盐水。末次给药1 h后，水合氯醛麻醉大鼠，收集腹主动脉血和肝脏组织。

    2.2 观察指标和检测

    2.2.1 血清学指标分析 大鼠麻醉后腹主动脉取血约5 mL，3000 r/min离心15 min取血清，-20 ℃保存备用 ......